细菌学基础课件.ppt

青霉素 头孢菌素 ?-内酰胺酶的作用位点 ?-内酰胺酶的作用位点 β－内酰胺酶的抑制作用 +H2O NH O NH3 C OH O +H2O CH2 N O S CH3 COOH R-CO-NH 青霉素酶 CH2 N H O=C S CH3 COOH R-CO-NH OH +H2O 头孢菌素酶 N O S R R-CO-NH COOH N H O S R R-CO-NH COOH C OH 单酰胺类 青霉素类 头孢菌素类 ?-内酰胺酶的分类 Bush K, et al. Antimicrob Agents Chemother 1995;39:1211 临床关注的主要?-内酰胺酶 超广谱?-内酰胺酶 (ESBLs) 高产头孢菌素酶 (AmpC酶) 碳青霉烯类酶 (金属酶及2f组 ?-内酰胺酶) 由质粒介导的2be类?-内酰胺酶 除了能水解青霉素类和一二代头孢菌素外，还能水解三代头孢菌素及单环?-内酰胺类氨曲南 被?-内酰胺酶抑制剂如克拉维酸(CA)所抑制 产ESBLs细菌是院内感染的主要致病菌之一 Sirot D. J Antimicrob Chemother 1995;36:19 超广谱?-内酰胺酶extended-spectrum ?-lactamases, ESBLs 产ESBLs菌株的耐药特点 细菌一旦产生此类酶，临床上对所有青霉素类、头孢类（1-4代）和单酰胺类抗生素耐药，而对碳青霉烯类和头霉烯类较为敏感（2001，NCCLS） 体外对酶抑制剂敏感，但使用酶抑制剂复合药不一定有效 AmpC 酶 特点（1） 往往在抗生素（特别是三代头孢菌素）治疗 过程中诱导产生，并有可能选择出持续高产AmpC β-内酰胺酶的突变株 所有β-内酰胺酶抑制剂均不能解决AmpC酶，相反，克拉维酸是强诱导剂 AmpC 酶 特点（2） 突变株不仅对第三代头孢菌素耐药，而且对 β-内酰胺类抗生素/酶抑制剂复合物也耐药。目前大约30%-50%肠杆菌属、弗劳地枸橼酸菌、沙雷菌等高产AmpC酶 碳青霉烯是潜在的AmpC酶诱导剂，但对AmpC酶高度稳定，故没有选择去阻遏突变株的作用 产 ESBL 与 AmpC 的差别 ESBL AmpC 耐药谱 多重 多重 对三代头孢 多耐药 耐药 头孢吡肟 多敏感 敏感 哌酮/舒巴坦 大多敏感 耐药 氧哌/三唑 大多敏感 耐药 头霉菌素 敏感 耐药 碳青霉烯类 敏感 敏感 2、氨基糖甙类钝化酶 可通过羧基磷酸化或羧基腺苷酰化而使药物结构改变，失去抗菌作用。依机理不同分为22种。 由于氨基糖甙类抗生素结构相似，常有交叉耐药现象。 3、氯霉素乙酰转移酶（chloramphenicol acetyl transferase） 由质粒编码，使氯霉素乙酰化而失去活性。 以已酰辅酶A为辅酶，可使氨基糖苷类药物 如链霉素、卡那霉素等已酰化而完全失活。 4、甲基化酶 金葡菌质粒可编码一种甲基化 酶，使50S亚基中的23SrRNA上的嘌呤甲基 化，从而对红霉素耐药。 二、药物作用靶位的改变 如青霉素结合蛋白（PBPs）是β-内酰胺类抗生素的作用靶位，MRSA菌株除了正常存在的PBP1-4外，尚有一种新的PBP称为PBP2a，具有转肽酶和转糖基酶活性。 PBP2a与β-内酰胺类抗生素亲和力低，在高浓度抗生素时，正常PBPs失活， PBP2a可代替正常PBPs的功能，参与细胞壁肽聚糖的合成，从此表现出对甲氧西林的耐药性。 革兰阴性菌细胞壁外膜屏障作用是由一类 孔蛋白（porin）所决定的。大肠杆菌有两个 主要的孔蛋白，OmpF和OmpC，孔径分别是 1.16nm和1.08nm，每个菌细胞外膜约含105个 孔蛋白通道。突变可使孔蛋白丢失或降低表达， 均会影响药物从胞外向胞内的运输。 铜绿假单胞对抗生素的通透性比其他G-菌 差是该菌对多种抗生素固有耐药的主要原因。 三、细胞壁通透性的改变 四、主动外排机制 主动外排机制首先在大肠埃希菌中发现，目前在不同细菌中已发现数十种多药主动外排系统。 铜绿假单胞菌的主动外排系统包括MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY等。 外膜通透性下降或主动外排作用是细菌对一些结构互不相同的药物（如β内酰胺类、喹诺酮类、氯霉素、四环素等）产生多重耐药的重要