GB/T 5413.31-1997婴幼儿配方食品和乳粉　脲酶的定性检验.pdf

GB/T5413-31-1997 自ii 言 本标准给出的是尿酶的定性测定方法，方法快速准确。 本系列标准从实施之日起，代什GB5413-85} 本标准由中国轻工总会提出。 本标准由全国乳.异.标准化中心归口。 本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心。 本标准参加起草单位:R生部食,.U.IV生监督检验所、浙江省轻 〔业研究所、哈尔滨森永乳.异.有限公 司、雀巢(中国)投资服务有限公司。 本标准主要起草人:王芸、殷晓红、房玉国、王克新。 中华 人 民共 和 国 国家标 准 婴 幼 儿 配 方 食 品和 乳 粉 GB/T5413-31-1997 W 酶 的定性 检 验 代替OB5413-85 Milkpovvderandformulafoodsforinfantandyoungchildren 一心 ualitativedetectionofurease I 范围 本标准规定了服酶的定性检验方法。 本标准适用于婴幼儿配方食.甘.和乳粉中服酶的定性检验。 2 方法原理 IR酶在适当酸碱度和温度下，催化尿素转化成碳酸铰。Iff碳酸钱在碱性条件下形成氢氧化钱，与钠 氏试剂中的碘化钾汞复盐作用形成棕色的碘化双汞钱。 NH2(]ONH}+2H20丝竺N(H4)2CO3 (NH4)2CO3+20H-- C023-+2NH40H K,EH914〕+KOH+NH3--NH}Hg2l+KI+H20 黄棕色沉淀 3 试P,Ii 3.1 尿素溶液:log压 。 3.2 钨酸钠溶液:1009/L. 3.3 A石酸钾钠溶液:20g/L. 3.4 硫酸:体积分数5%. 3.5 中性缓冲液 取下述磷酸氢 几钠溶液61lml,I磷酸二氢钾溶液389mL，两种溶液混合均匀。 3.5.1磷酸氢二钠溶液 称取无水磷酸氢二钠9.47g,溶J--10OOmL蒸馏水中。 3.5.2 磷酸二氢钾溶液 称取磷酸二氢钾9.07g,溶F-1000ML蒸馏水中。 3.6 钠氏试剂 称取红色碘化7j}(Hg12)55g,碘化钾41.25g,溶I--250ml,蒸馏水中，溶解后，倒入I000ml,容量瓶 中。再称取氢氧化钠14她溶于500ml,水中，溶解并冷却后，再缓慢地倒入上述1000ML的容量瓶中，加 水至刻度，摇匀，倒入试剂瓶静置后，用上清液。 4 操作步骤 4.1 取IOML比色管甲、乙两支，各加入0.Ig样品imL燕馏水。振摇0.5min(约100次)。然后各加 国家技术监督局 1997-05-28批准 1998-09-01实施 GB/T5413-31-1997 入ImL中性缓冲溶液(3.5). 4.2 向甲竹(样品管)加入ImL尿素溶液((3.1)。再向乙管 空〔自对照管)加入ImL蒸馏水，两管摇匀 后，置于40℃水浴中保温20min. 4.3 从水浴中取出两管后，各加4mL蒸馏水，摇匀，再加ImL钨酸钠溶液(3.2),摇匀，加ImL硫酸溶 液(3.4),摇匀，过滤备用。 4.4 取L述滤液2mL，分别注入 二支25mL具塞的比色管中。各加入15mL水，IML酒石酸钾钠溶液 (3.3),2niL钠氏试剂(3.6),M.后以蒸馏水定容罕25rnL,摇匀。观察结果。 分析结果的表述 分析结果按表 1进行判断。 农 1 结果的判断 服醉定性 表示符号 显 示 精 况 强阳性 + ++ + 砖红色混浊或M清液 次强阳性 十 十+ 桔红色ig.清液