上课用2.1微生物的实验室培养[.pptVIP

碳源、氮源、特殊营养物质的比较 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环_______ 在_______旁冷却接种环，并打开棉塞 将试管口通过火焰 .将已______的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液 左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划__________条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养基。 .将试管通过火焰，并塞上棉塞 火焰 冷却 三至五 灼烧接种环，待其冷却后，从第一区域划线的_______开始往第二区域内划线。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。 末端 烧红 将平板_____放入培养箱中培养。 倒置 1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 答：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 4.稀释涂布平板法 是将菌种进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 稀释涂布平板法过程： 系列稀释操作 涂布平板操作 　　1.将分别盛有9mL水的6支试管灭菌，并按101~106的顺序编号。 系列稀释操作 2.用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。 3.从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入102倍稀释的试管中，重复第2步的操作。依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。 注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰1~2cm处. 涂布平板操作 * 微生物的类群 原生生物 原核生物 真菌 病毒 如酵母菌 单细胞的动植物 如草履虫、单细胞藻类等 微生物包含了除植物界和动物界以外的所有生物 无细胞结构 真核细胞 细菌、蓝藻 原核细胞 细菌的形态 球菌 弧菌 杆菌 专题2 微生物的培养与应用 了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、课题目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 二、课题重点和难点： 三、技能目标： 一、基础知识梳理 （一）培养基 1.概念：培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生物繁殖的营养基质。 （1）按物理状态来分： 固体培养基、液体培养基和半固体培养基。 （2）按成分来分：天然培养基和合成培养基。 （3）按功能来分：选择培养基和鉴别培养基。 2.分类： 几种菌落及其形态 微生物需要的四大类营养要素物质是： 3.培养基的构成 1.碳源 2.氮源 3.无机盐 4.水 凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。 ①无机碳源：CO2；NaHCO3；碳酸盐等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、蛋白质、花生粉饼、石油等 ⑴概念: ⑵来源： ⑶不同微生物所利用的碳源不同： 微生物的碳源 异养型微生物的碳源为：含碳有机物（有机碳） 自养型微生物的碳源为：含碳无机物（无机碳） ①无机氮源：N2、NH4+氨盐、NO3-硝酸盐、NH3。 ②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。 微生物的氮源 ⑴概念： ⑵来源： ⑶固氮微生物所利用的氮源是： 特殊要求 培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 氮气 酶、核酸等的组成成分 维生素、氨基酸、碱基 特殊营养物质 合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物