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厌氧性细菌白喉杆菌结核杆菌课件
实验内容 厌氧菌:破伤风杆菌、产气荚膜杆菌 1. 厌氧培养法 2.破伤风杆菌、产气荚膜杆菌、肉毒梭菌的生物学特性 需氧芽孢杆菌:炭疽杆菌和枯草杆菌的生 物学特性 白喉杆菌: 结核杆菌: 本次实验示教 产气荚膜“汹涌发酵”、破伤风庖肉培养管产气荚膜庖肉培养管 动物实验:小鼠破伤风 厌氧培养:焦性没食子酸法 枯草普通平板,白喉亚碲酸钾血平板 本次实验操作 镜下观察:炭疽杆菌、枯草杆菌、破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽杆菌串珠、肉毒梭菌。 实验标本:病人痰液和白喉培养物各1支 实验操作:Neisser染色(白喉培养物) 抗酸染色(病人痰液) 小结 厌氧培养法 1.庖肉培养基厌氧培养法 2.焦性没食子酸法 3.气袋法 4.厌氧罐法 5.厌氧手套箱法 破伤风梭菌 庖肉培养基 破伤风梭菌血琼脂平板 3. 破伤风外毒素毒性作用试验(示教) 原理:破伤风梭菌产生的外毒素封闭抑制性神经介质释放,伸肌、屈肌同时强烈收缩,导致骨骼肌痉挛。 产气荚膜梭菌庖肉培养基 产气荚膜梭菌 血琼脂平板 “汹涌发酵”现象 产气荚膜梭菌能分解牛乳培养基中的乳糖产酸,使酪蛋白凝固,同时产生大量气体将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状,将培养基中隔绝氧气的凡士林冲向试管口,甚至冲开管口棉塞,此现象称“汹涌发酵”。 炭疽杆菌 炭疽杆菌串珠试验 炭疽杆菌(普通平板) 炭疽杆菌(血平板菌落) 枯草杆菌 枯草杆菌 枯草杆菌 白喉杆菌的奈瑟氏染色 取吕氏血清斜面上培养的白喉杆菌涂片 Neissser染色 Albert染色 白喉亚碲酸钾血平板 结核杆菌 结核杆菌的抗酸染色 痰涂片 庖肉培养基培养法 由于肉渣培养基含不饱和脂肪酸,氧化时能消耗溶解于培养液中的氧气,且组织中所含的还原性化合物为谷胱甘肽(含—SH基)可使培养基的氧化还原电势下降,造成厌氧环境,故适于培养厌氧菌。 焦性没食子酸法(示教) 将厌氧菌接种血平板。用方形的消毒玻板一块,中央放焦性没食子酸0.2g,覆盖纱布或棉花一小块,当加10%NaOH 0.5ml后,迅速将培养皿倒置在玻板上,周围用溶化的石蜡密封,置37℃培养24~48h后,取出观察。 3 2 1 干燥 固定 石炭酸复红加温染色5分钟 冷却 水冲洗 3%盐酸酒精脱色1分钟 水冲洗 碱性美蓝复染1分钟 待干镜检 水冲洗 * * 厌氧性细菌 需氧芽孢杆菌 白喉杆菌 结核分枝杆菌 第十次实验 1.掌握其他细菌(厌氧性细菌、需氧芽 孢杆菌、白喉杆菌、结核分枝杆菌) 的形态、培养特点。 2.掌握白喉杆菌的奈瑟氏染色和结核杆 菌的抗酸染色方法。 实验目的与要求 破伤风梭菌 1. 形态观察----示教 2. 培养物观察 ----示教 产气荚膜梭菌 1.形态观察----示教片 2.培养物观察----示教 肉毒梭菌 形态观察----示教片 白喉杆菌 干燥 固定 奈瑟氏染液 第一液(美兰) 第二液 水冲洗 水冲洗 待干镜检 染7分钟 染1分钟 涂片 奈瑟氏染液 菌落观察 白喉棒状杆菌 血平板 Elek平板试验结果 Elek Test 沉淀线(阳性) 含白喉抗毒素滤纸片 白喉杆菌菌苔
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