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四棱豆生理生化特性初步研究 　　[摘 要]：叶绿素含量的高低是反映植物光合作用强弱的一个重要指标，也是影响植物有机物合成的重要因素。可溶性糖、丙二醛和可溶性蛋白的含量是了解植物抗逆性的一个重要指标。通过研究两种四棱豆的不同的部位的生理生化指标，结果表明：攀援四棱豆叶片叶绿素含量最高，且攀援四棱豆的叶片、茎尖和果实的叶绿素含量均高于矮生四棱豆。攀援四棱豆叶中的可溶性糖和MDA含量均最高，且高于矮生四棱豆。攀援四棱豆叶片受环境胁迫的影响可能较大，而攀援四棱豆茎尖和果实受环境胁迫的影响可能较小。攀援四棱豆的可溶性蛋白含量高于矮生四棱豆的含量。攀援四棱豆叶片中可溶性蛋白含量最高，而矮生四棱豆茎尖和果的可溶性蛋白含量相近。 　　[关键词]：叶绿素；可溶性糖；MDA；可溶性蛋白；四棱豆 　　1.引言 　　四棱豆（Psophocarpus tetragonolobus Dc.）是豆科四棱豆属一年???或多年生缠绕草本植物，别名翼豆、四角豆等。四棱豆的嫩荚、块根、种子、嫩梢和叶均可食用，营养极其丰富，故又被称为“绿色黄金”、“奇迹植物”[1]。四棱豆的嫩荚、嫩叶和花的蛋白质含量十分丰富。其营养价值、经济价值和药用价值已引起世界性的重视和研究，成为许多国家争相开发利用的植物资[2-3]。现在，在美国、印度、印度尼西亚、斯里南卡、非律宾、加纳等许多国家，以及在我国海南、广西、广东、湖 南、湖北等地区均已广泛种植和开展研究 。但由于各种原因，四棱豆的推广和研究进展比较缓慢[4-6]。 　　叶绿素含量是反映植物特别是光合机构生理状况的一个基本指标，植物生理研究中经常涉及叶绿素含量的测定[8-9]。丙二醛含量的多少可以代表膜损伤程度的大小[10]。因此，测定其丙二醛含量的变化，旨在为四棱豆的抗逆性测定奠定基础，为四棱豆的育种和资源开发利用提供科学依据。 　　基于前人对四棱豆已经做出了一些研究，但缺乏对不同种类四棱豆不同生长部位的生理生化特征的研究。本文以两种不同品种的四棱豆相比较，通过测定不同部位几种生理生化指标的变化，为四棱豆的综合利用提供实验依据。 　　2.材料与方法 　　2.1不同种类实验 　　2010年3月播种； 　　不同种类的支持物设计：198四棱豆在四肢架旁播种，矮生四棱豆匍匐处理。 　　2.2样品采集 　　攀援四棱豆和矮生四棱豆于肇庆良种场生长3个月后，采集新鲜的四棱豆功能叶、茎尖、果实用于测定叶绿素、丙二醛、可溶性糖、可溶性蛋白。 　　试剂：80﹪丙酮、纯丙酮、10﹪TCA、0.6%TBA、KH2PO4（20mmol/L）、G-250染色液 　　2.3测定方法 　　2.3.1鲜叶中叶绿素的含量测定[9] 　　取新鲜样品0.25g放入研钵中，加纯丙酮研磨2.5ml、碳酸钙和石英砂研磨成匀浆，再加80﹪丙酮2.5ml，将匀浆转入离心管，适量的80﹪丙酮洗涤研钵，离心4000R，10min，取上清液用80﹪丙酮定容到10ml； 取上清液1ml，加80﹪丙酮4ml稀释后转入比色杯进行光密度的测定663nm和645nm的OD值；对照组用80﹪丙酮。计算色素提取液中叶绿素a、叶绿素b及叶绿素a+b的浓度。 　　2.3.2鲜叶中可溶性糖和丙二醛（MDA）含量测定[9] 　　取新鲜样品0.5g放入研钵中，加5ml10﹪的三氯乙酸（TCA）和少量石英砂进行研磨提取，转入离心管，离心4000R，10min，提取上清液2ml，加入0.6%TBA液，混匀加塞，于沸水浴沸煮15min，迅速冷却，离心，取上清液进行显色反应并测定450nm、532nm和600nm 的OD值，最后计算MDA含量。 　　2.3.3鲜叶中可溶性蛋白含量测定[10] 　　取新鲜样品0.5g放入研钵中，加KH2PO4（20mmol/L）2ml和少量石英砂，研磨，用KH2PO4定容10ml，，放置在30°水浴（0.5～1h）再离心4000R，20min取离心后的上清液，定容到10ml；取样液0.1ml加KH2PO42ml，加G-250染色液3ml，测620nm的OD值。 　　3.结果与分析 　　3.1种类四棱豆不同部位的叶绿素含量的比较 　　叶绿素含量的高低是反映植物光合作用强弱的一个重要指标，也是影响植物有机物合成的重要因素。攀援型四棱豆和矮生型四棱豆不同器官中总叶绿素、叶绿素a、叶绿素b含量呈现相同的规律，都是叶片含叶绿素最高，而茎尖次之，而果实含量是最少。（见图1A-C）；两种四棱豆比较，攀援型四棱豆叶片的总叶绿素、叶绿素a、叶绿素b含量均比矮生型四棱豆高，而矮生四棱豆茎的总叶绿素、叶绿素a、叶绿素b含量则均比攀援型四棱豆高，两种四棱豆果的总叶绿素、叶绿素a、叶绿素b含量则无明显差异；图1-D表明攀援四棱豆叶片的叶绿素a/b的比值最大，这说明了叶绿素b的含量少，而叶绿素a的含量较多。