第九章：血型及血痕检验PPT.pptVIP

抗人血清、抗人Hb血清的非特异性交叉反应： 近亲反应：指抗人血清与抗人血红蛋白血清和那些与人类关系相近的高级灵长类动物血发生的非特异性交叉反应 哺乳类反应：抗人血清与抗人血红蛋白血清和那些与人类关系较远的哺乳类动物血出现非特异性交叉反应 消除非特异性反应的方法： 吸收法除去抗血清中的交叉反应抗体 稀释抗原（血痕浸出液） 沉淀素抗体的两个特异性 种属特异性：指抗血清仅与某种属动物蛋白起反应，而不与其它种属蛋白起反应的特异性如：抗人血清 器官特异性：指抗血清仅与某种属动物的某一脏器蛋白起反应的特异性如：抗人血红蛋白血清 (3)抗原（血痕浸出液）的标准： 澄清透明，淡稻草黄色 控制蛋白含量在1/1000以下 (4)沉淀反应操作及注意问题 剪取0.5cm2待测血痕检材，剪碎，加0.5ml生理盐水室温下浸泡2h，后放入4℃冰箱过夜。 血痕浸液 抗血清 （5）实验中对照的设置 阳性对照：已知人血（浓度1/1000） 阴性对照：两个当地常见动物血（浓度1/200） 空白检材对照 生理盐水对照 正常兔血清+检材 血 型 与 血 痕 检 验 主讲：周鑫 我国三国时代记载“滴骨验亲法”； 1247年，宋慈《洗冤集录》记录“滴骨验亲法”、“合血法”； 1667年，法国Denys首次把羊血输给一名贫血病人； 19世纪英国Blundell重新尝试输血，主张用人血相输。1818年，他成功地用输血疗法救活了一名产后大出血的产妇； 1900年，Ehrlich将一只山羊的红细胞注给另一只山羊后，在后者的血清中发现了同族溶血素，能使前者的红细胞溶血，从而能鉴别同一物种中的不同个体； 1901年，奥地利学者Landsteiner研究不同人的红细胞之间是否有免疫学反应，终于发现了人类第一个血型系统，即ABO血型系统； 1924年，Bernsteiner提出ABO血型的遗传学说。 一、概述 广义的血型：人类血液各成分中由遗传基因控 制的遗传学多态性标记 血清蛋白型——Gc、Hp、Gm、Km 红细胞酶型——PGM、AcP 白细胞血型——HLA-A、B、C、DP、DQ、DR 精液酶型——DIA3、γ-GPT 粒细胞血型、血小板血型、唾液蛋白型胎盘酶型 狭义的血型：红细胞表面抗原的差异 ，这种抗原差异是属于 同种异体的抗原差异是受遗传控制的。 红细胞血型——ABO、MN、Rh （一）血 型 概 念 血型物质 ——红细胞表面的特异性抗原物质。它同样也是同 种异体的抗原 血型测定 ——根据抗体具有特异性这一特点，将特异性抗体血清和具有相应特异性抗原的红细胞发生凝集反应，来决定红细胞的血型。 （二）红细胞血型抗原 抗原——凡能刺激机体引起特异性免役反应的物质均为Ag(antigen)。 红细胞抗原的化学本质： ABO——糖蛋白、糖脂（ABO血型的分泌型是糖蛋白） MN——糖蛋白 Rh——蛋白质 ABO血型抗原决定簇为六碳糖所组成的多糖 抗原决定簇Antigenic determinant ——又称表位，是指抗原性物质表面决定该抗原特异性的特殊化学基团，是抗原分子结构中的免疫显性基因。 （四）红细胞的凝集反应 RBC表面的负电荷及动电位 红细胞表面负电荷是由红细胞表面唾液酸羟基电离产生，使红细胞表面之间可保持一定的距离 动电位越大，两红细胞间距越大 动电位越小，两红细胞间距越小 凝集反应的两个步骤 A 致敏（抗原和抗体的结合） 即抗原决定簇和抗体Fab段高度可变区结合，为非 共价键的可逆性结合。 实际中以凝集素效价、亲合力描述结合能力 凝集素效价——使颗粒性抗原（红细胞）发生肉眼可见的凝集时，凝集素抗体的最大稀释度的倒数。 亲合力——发生凝集的强度。 B 凝集 ①抗原性强、稳定性好（抗原决定簇为多糖），对高温有一定耐受性； ②除红细胞外，在多种组织也含有ABO血型抗原； ③有天然抗体，有规律地分布在不同血型的血清中。可以检测抗体的型别，增加参照指标； ④有分泌型和非分泌型（用常规中和法检测）； ⑤分型简单，可在基层进行，进行大范围的筛选工作。 二、ABO血型系统 （一）法医学鉴定意义 （二）ABO血型系统的分类 血型 基因型 红细胞抗原 血清中抗体 表型频率 A AA、AO A 抗B 0.265 B BB、BO B 抗A 0.319 O OO -- 抗A、抗B 0.323 AB AB A、B -- 0.093 （三）ABO血型的遗传及血型物质 H基因—α2-L-岩藻糖基转移 酶 A基因—α3-N-乙酰-D-氨基 半乳糖转移酶 B基因—α3-D-半乳糖转移 酶 O