缺血性脑损伤中HSP72对神经元保护作用实验研究.docVIP

缺血性脑损伤中HSP72对神经元保护作用实验研究 　　 【摘要】 目的 探讨缺血性脑损伤中HSP72对大鼠神经元的保护作用及其分子机制。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注对照组、热休克处理组、HSP72反义寡核苷酸组及溶剂组。采用焦油紫染色、免疫印迹检测大鼠缺血再灌注后海马神经元损伤和脑组织AKT、Bad(Ser 136)的磷酸化情况。结果 热休克处理组与缺血再灌注对照组、HSP72反义寡核苷酸组和溶剂组相比海马神经元损伤减轻，脑组织AKT和Bad(Ser 136)磷酸化升高(P 　　【关键词】缺血性脑损伤；HSP72；AKT；Bad(Ser 136) 　　 　　Study on the neuroprotection of HSP72 during brain injury induced by ischemia 　　 　　ZHANG Fang,LIU Hong-zhi,ZHANG Zhao-cheng,et al. 　　Basic Medical Science,Xuzhou Medical College,Xuzhou City,Jiangsu 221004,China 　　? 　　【Abstract】 Objective To investigate the molecular mechanism of neuroprotection of HSP72 during Brain injury induced by ischemia.Methods SD rats were divided randomly into 5 groups:sham-operated;cerebral ischemia and reperfusion;cerebral ischemia and reperfusion+heat shock treatment;cerebral ischemia and reperfusion+antisense oligonucleotides and reperfusion+solvent.Brain injury in hippocampus of rats and change of phosphorylation of AKT and bad(ser 136)were detected by cresly violet-strained or immunoblot assay.Results Comparing with cerebral ischemia and reperfusion group, antisense oligonucleotides and solvent group,the brain injury and phosphorylation of AKT and bad(ser 136) of heat shock treatment team increased significantly.ConclusionHSP72 protected the neurons in hippocampus from ischemia by increasing phosphorylation of AKT and bad(ser 136).? 　　【Key words】Ischemic brain injury; HSP72;AKT;Bad(Ser 128) 　　? 　　热休克蛋白（HSPs）因具有细胞抗氧化保护作用而成为研究的热点。高温能诱导热休克蛋白合成，HSP72是增强热耐受力的诱导型 HSPs的一种,但是它对缺血性脑损伤后神经元的保护机制尚不十分清楚。2008年1月至2008年9月，笔者通过观察HSP72对大鼠全脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及AKT和Bad(Ser 136)磷酸化的影响，以探讨其对大鼠神经元的保护作用及机制。? 　　1 材料与方法? 　　1．1 动物及分组 雄性健康SD大鼠40只，体质量250～300 g，清洁级。将大鼠随机均分为两组，缺血15 min再灌5 d为甲组，再灌12 h为乙组。各组又分为假手术组、缺血再灌注对照组、热休克处理组、HSP72反义寡核苷酸组，各5只。? 　　1．2 方法? 　　1．2．1 动物模型制备 用20%水合氯醛(300～350 mg/kg)腹腔注射麻醉动物后，分离双侧颈总动脉并电凝椎动脉[1-2]。手术第2天于动物清醒状态下结扎双侧颈总动脉，使全脑缺血15 min，然后不同的时间再灌注。缺血时保持其直肠温度在36．5℃～37．5℃。以缺血动物体征表现判断缺血模型的可靠性。假手术组的处理同实验组，但不结扎双侧颈总动脉。热休克处理组于缺血前2 h置于42℃温箱中热休克预处理40 min，HSP7