鸦胆子油乳对hep-2细胞增殖抑制及凋亡诱导作用的研究-study on proliferation inhibition and apoptosis induction of brucea javanica oil emulsion on hep - 2 cells.docxVIP

宁夏医科大学学位论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进 行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。除文中已经特别加以注明 引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品 成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式 标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿年月日年月日宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文，同意学校按规定向国家有 关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权宁 夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。可以公 布（包括刊登）论文的全部或部分内容。（必威体育官网网址论文在解密后应遵守此规定）论文作者签名＿＿＿＿＿论文导师签名＿＿＿＿＿ 年月日年月日鸦胆子油乳对 Hep-2 细胞增殖抑制及凋亡诱导作用的研究摘要目的 探讨鸦胆子油乳注射液对喉癌 Hep-2 细胞的抑制作用及机制。方法 利用 MTT 比色法检测五个不同药物浓度（0.1、0.2、0.4、0.6、0.8g/L）对细胞的抑制率；采用倒 置显微镜观察细胞的形态变化；流式细胞仪检测细胞凋亡率；实时荧光定量 PCR 检测 凋亡基因 Bcl-2、Bax 的表达。结果 MTT 显示鸦胆子油乳对 Hep-2 细胞的生长抑制作用 呈剂量和时间依赖性。倒置显微镜下可见细胞凋亡的形态学改变，显示加药组细胞染色 体固缩，聚集呈块状、新月状，出现凋亡小体。流式细胞仪检测显示 0.2、0.4、0.6 g/L 药物作用 48h 后凋亡率分别为（42.58±4.36）﹪、（57.71±3.07）﹪和（75.50±3.93）﹪， 显著高于对照组（0.96±0.17）﹪，差异有统计学意义（F=8.82，P0.01）；实时荧光定 量 PCR 结果显示随着鸦胆子油乳注射液的浓度增加，Bcl-2mRNA 的表达减少，BaxmRNA 的表达量逐渐上升，与对照组存在统计学差异（P0.01）。结论 鸦胆子油乳诱导人喉 癌 Hep-2 细胞凋亡是通过凋亡机制，下调 Bcl-2mRNA 和上调 BaxmRNA 的表达量来促 进肿瘤细胞凋亡，作用呈剂量和时间依赖性。关键词 鸦胆子油乳注射液；喉癌 Hep-2 细胞；凋亡Effect of Brucea javanica oil emulsion on proliferation and apoptosis of human laryngeal cancer Hep-2 cellsABSTRACTObjective To Explore the effect of Brucea javanica oil emulsionon on the growth of human laryngeal Hep-2 cells .Medthods MTT assay was used to observe the proliferation of human laryngeal carcinoma Hep-2 cells treated with various concentrations of Brucea javanica oil emulsion at different times. Morphologic changes of Hep-2 cells was observed byinverted microscopy after treated with Brucea javanica oil emulsion ； Flow cytimetry(FCM )and Real-time quantitative PCR was applied to measure the apoptosis rate and the expression of Bcl-2 and Bax mRNA in the Hep-2 cells treated with Brucea javanica oil emulsion at 0.2,0.4,0.6 g/L for different time.Result Brucea javanica oil emulsion inhibited growth of Hep-2 cells in a dose-dependent and time-dependent manner(P0.01). Typical morphological changes of apoptotic cells,cellular rounding-up,cytoplasmiccontraction