FISH在淋巴瘤诊治中地应用.pptVIP

如 FISH 得水FISH在淋巴瘤诊治中的应用简介 WHO(2008)造血与淋巴组织肿瘤分类 1.骨髓增殖性肿瘤 2.骨髓和淋巴肿瘤，伴嗜酸性粒细胞和PDGFRα、PDGFRβ或PGFR1异常 3.骨髓增生异常/肿瘤 4.骨髓增生异常综合征 5.急性髓系白血病（AML）和相关前驱细胞肿瘤 6.急性未分化系列白血病 7.前驱淋巴细胞肿瘤(B、T) 2大类，9亚型 8.成熟B细胞肿瘤 27大类，39亚型 9.成熟T及NK细胞肿瘤 18大类，22亚型 10.霍奇金淋巴瘤 11.组织细胞和树突细胞肿瘤 12.移植后淋巴增殖性疾病（PTLD） 方法比较 淋巴造血系统肿瘤——FISH 检测意义 诊断/鉴别诊断 ? AML, ALL, CML, CLL, MM, MDS, NHL, etc ? 已有明确遗传学异常相关的专有亚型近20种 指导治疗 ? BCR/ABL与Gleevec（格列卫） ? PML/RARA 与 ATRA（全反式维甲酸） ? CLL 与 Rituxan（美罗华）及 Campath（阿仑单抗） 提示预后 ? MM: IGH/CCND1, IGH/FGFR3, IGH/MAF, 非整倍体 ? CML: 9q34 Deletions, 8#3体 ? ALL: TEL/AML1, MLL 转位, BCR/ABL ? CLL: p53 缺失, ATM 缺失 淋巴瘤的分子机制 主要机制-普遍性 ?常见的细胞遗传学异常包括：易位、倒位、插入、复制、扩增、缺失、异倍体等。 ? 淋巴瘤主要的核型表现：癌基因分别并置到B、T细胞相关的Ig和TCR位点的转录增强子下，导致相应蛋白表达提高或调控功能紊乱。 ?异常核型通常和淋巴瘤细胞亚型密切相关，具有诊断价值。 淋巴瘤的分子机制 主要机制-复杂性 ? 在详细的淋巴瘤分类中并不是所有的病例都会出现预期的易位，如t(14;18)(q32;q21) 在滤泡性淋巴瘤中出现率为85％ ?一些易位类型在淋巴瘤中普遍存在如在伯基特淋巴瘤中出现如t(8;14)(q24;q32)易位，在弥漫性大B 细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤和其他淋巴瘤中均能看到。 结论：FISH诊断结果必须结合病人临床表征、病理学诊断、免疫组化报告等，综合数据分析是正确诊断淋巴瘤必不可少的手段。 FISH技术原理 探针类型 探针商品分类 ? LSI?（Locus Specific Identifier）基因识别位点探针 ? CEP?(Chromosome Enumeration Probe)着丝粒探针 ? Telvysion?( Telosome Detection)端粒探针 探针类型 探针类型 探针设计 探针设计-双色单融探针（DC /SF） 染色体、基因重排检测 ——已知断点的平衡易位 探针设计-双色额外信号探针（ES） 很好地克服了双色单融出现的假阳性(1.5～3%) 探针设计双色双融探针（DC/DF） 探针设计 三色双融探针（TC/DF） 探针设计–双色分离探针 染色体、基因重排检测 ——已知断点的基因易位 常见淋巴瘤——DLBCL ? DLBCL占NHL中30 -40% ? 多种亚型，形态学、免疫表型、细胞遗传学及分子特征各有不同 ? 最常见遗传学异常： –t(3q27) BCL6 重排：30 –40% –t(14;18)(q32;q21) IGH/BCL2：10 –40% –t(8q34;14q32) c-MYC/IGH：7 –15% ? 同时伴有t(14;18) 和8q34/c-MYC 基因重排患者，临床进展非常快，预后极差 B-NHL 最常用探针 常见淋巴瘤——FL ? FL 占NHL 22 –35%，仅次于DLBCL ? 80 –90% FL存在t(14;18)(q32;q21)，即IGH/BCL2 重排 ? t(14;18)阴性者通常存在BCL6基因重排(ABR等） ? FL I～III级，惰性→高侵袭性 ? 25 -35%患者伴有其他细胞遗传学异常(例如：6q或9p缺失，X染色体非整倍性，7#、12#及18#3体，等)，会发展为DLBCL ? 在转化为DLBCL的患者中，73%病例发现9p21缺失 常见淋巴瘤——FL ? FL 占NHL 22 –35%，仅次于DLBCL ? 80 –90% FL存在t(14;18)(q32;q21)，即IGH/BCL2 重排 ? t(14;18)阴性者通常存在BCL6基因重排(ABR等） ? FL I～III级，惰性→高侵袭性 ? 25 -35%患者伴有其他细胞遗传学异常(例如：6q或9p缺失，X染色体非整倍性，