青藤碱抑制hela细胞增殖与诱导凋亡的pi3kakt信号转导通路研究-pi 3 kakt signal transduction pathway of sinomenine inhibiting hela cell proliferation and inducing apoptosis.docxVIP

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2018-05-29 发布于上海
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青藤碱抑制hela细胞增殖与诱导凋亡的pi3kakt信号转导通路研究-pi 3 kakt signal transduction pathway of sinomenine inhibiting hela cell proliferation and inducing apoptosis.docx

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青藤碱抑制hela细胞增殖与诱导凋亡的pi3kakt信号转导通路研究-pi 3 kakt signal transduction pathway of sinomenine inhibiting hela cell proliferation and inducing apoptosis

Conclusion: Sinomenine can inhibit the growth of HeLa cells in vitro and this effect results from Sinomenine induced apoptosis. The possible molecular mechanism of Sinomenine induced apoptosis are as follows: The expression of COX-2 and Akt has been suppressed. At thesame time， the Caspase-3s expression was up-regulated.Key words: Sinomenine; HeLa cells ; apoptosis ; Western blot; COX-2; Akt; Caspase-3一、缩略词表SINSinomenine青藤碱ILInterleukin白介素TNFtumor necrosis factor肿瘤坏死因子NKNatural killer cell自然杀伤细胞COX-2Cycloxygenase-2环氧化酶 2PGEProstaglandin E前列腺素 EPKCProtein kinase C蛋白激酶 CMAPKmitogen-activated protein kinase丝裂原活化蛋白激酶TXA2Thromboxane A2血栓烷 A2Akt/PKBProtein kinase B蛋白激酶 BPMSFPhenylmethanesulfonyl fluoride苯甲基磺酰氟MTTMethyl thiazoly tetrazolium四甲基偶氮唑蓝DMSODimethyl sulfoxide二甲基亚砜HRPHorseradish peroxidase辣根过氧化物酶LPSLip polysaccharide脂多糖SDSSodium dodecyl sulfate十二烷基硫酸钠PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液TBSTTris Buffered Saline with Tween-20Tris 缓冲液附录 3：声明本人承诺：硕士学位论文青藤碱抑制 HeLa 细胞增殖与诱导凋亡的 PI3K/Akt 信号转导通路研究是本人在成都中医药大学攻读硕士学位期间在导师指导下独立进行研究工作所取得的成果，无抄袭及编造行为。该论文著作权及涉及的有关知识产权归成都中医药大学所有，有关该学位论文成果的开发、转让、论文发表等，均需征得导师和成都中医药大学同意。本人同意：成都中医药大学有权通过影印、复印等手段汇编学位论文予以保存，并提供查阅和借阅；有权按照规定向国家有关部门、机构送交论文及电子版，公布（或刊登）论文内容。(注：论文涉及必威体育官网网址部分请事先做好处理)硕士生签名：导师签名：年月日二、插图给药前 HeLa 细胞生长情况给药 72 小时后 HeLa 细胞生长情况空白组低剂量组中剂量组高剂量组Western blot 图片COX-2:p-Akt：空低中高COX-2β -actinCaspase-3：空低中高p-Akt β -actin空低中高Caspase-3 β -actin三、前言青藤碱是防己科植物青藤及毛青藤的藤茎中提取的一种生物碱，有明确的化学结构(C19H23NO4，MW329.38)[1]。目前对青藤碱的药理作用研究主要集中在神经系统、心血管系统和免疫系统。现有的研究表明：青藤碱对中枢神经系统有镇静、催眠、镇痛以及一定程度的解热作用；对心血管系统有降压、抗心律失常和保护心功能的作用；对免疫系统的作用包括抗炎和免疫抑制作用[2-4]。抑制炎症局部 PGE 的合成是其抗炎的机制之一[5]，青藤碱可能是通过选择性抑制环氧化酶-2(COX-2)的活性，达到抑制 PGE2 的合成的目的。青藤碱的免疫抑制作用表现在可引起小鼠胸腺及脾脏重量减轻，对小鼠抗羊红细胞抗体产生及对羊红细胞诱导的迟发超敏反应均有明显的抑制作用。在体外，青藤碱对小鼠脾细胞的增殖反应也呈较强的抑制作用。青藤碱也可通过抑制滑膜细胞增生、诱导滑膜细胞凋亡，诱导脾淋巴细胞凋亡，从而减轻 RA 的免疫反应[6]。目前，青藤碱诱导细胞凋亡作用的研究还局限在对凋亡细胞的细胞观察层面上，对其分子机制还需进行深入研究。青藤碱主要用于风湿、类风湿性关节炎，肾小球肾炎等疾病的治疗[7]。但目前尚未见有人对青藤碱抑制肿瘤的作用机制进行研究的报道。同样作为免疫抑制剂，并能引起细胞凋亡的雷公藤甲素，已经有人对其进行了诱导肿瘤细胞凋亡的研究，证明雷公藤甲素能抑制肿瘤细胞增殖，促进凋亡发生[8]。此次实