细胞融合、单克隆抗体与克隆动物.pptVIP

二、动物细胞融合技术及单克隆抗体 （一）动物细胞融合 与植物原生质体融合基本相同。 1、原理： 灭活病毒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 形成杂种细胞 病毒颗粒 细胞核 2、方法： 电刺激、聚乙二醇等理化方法及灭活仙台病毒。 细胞膜流动性 （二）单克隆抗体制备 1、传统抗体生产方法： 抗原 动物体内 B淋巴C 抗体 血清中分离 注射 从已免疫动物的血清中分离。 问题： 产量低、纯度低。 2、单克隆抗体制备过程： （1）本过程利用了哪些技术？ 免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理。 （2）为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有B细胞产生特异抗体的能力，而且还有无限增殖的本领。 3、单克隆抗体的应用： 作诊断试剂；用于治疗疾病和运载药物等。 培养骨髓瘤细胞 免疫小鼠 细胞融合 杂交（融合）细胞 选择培养基上筛选杂交瘤细胞 （至少3种） 抗体检验 抗体检验 杂交瘤细胞 单克隆抗体 单克隆抗体 注射小鼠 体外培养 筛选并克隆产生单一抗体的细胞 克隆杂交瘤细胞 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 三、动物的克隆繁殖 （一）实例：克隆绵羊“多例”。 （二） “多莉”克隆过程： 苏格兰黑面母羊卵 白色芬兰母羊乳腺细胞 除去核 去核卵 取出细胞核 乳腺细胞核植入去核卵中并电激 融合卵 8细胞胚 植入代孕羊子宫 “多莉”羊 （三）实验表明的动物克隆条件： 1、具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞（如乳腺上皮细胞）。 2、能有效调控细胞核发育的细胞质物质（如去核卵的细胞质） 3、完成胚胎发育的必要的环境条件。 与芬兰羊不完全相同 （四）体细胞克隆成功的意义 1、证明了高度分化的细胞也可以回复到类似受精卵时期的功能。 2、证明了细胞质具有调控细胞核发育的作用。 （五）体细胞克隆的应用 为遗传疾病的治疗、优良品种的培育等提供了重要途径；对濒危动物的保存也有重要意义。