bfgf促进hie新生仔鼠内源性神经干细胞增殖和分化实验分析word格式论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 英文缩略词 英文缩写 英文全称 中文名称 bFGF basic fibroblast growth factor 碱性成纤维细胞生长因子 HIE hypoxic ischemic encephalopathy 缺氧缺血性脑病 NS normal saline 生理盐水 BrdU 5-bromodeoxyuridine 5-溴脱氧尿苷 nestin 神经巢蛋白 GFAP glial fibrillary acidic protein 胶质纤维酸性蛋白质 NSE neuron specific enolase 神经元特异性烯醇化酶 NSCs neural stem cells 神经干细胞 SGZ subgranular zone 颗粒下区 SVZ subventricular zone 室管膜下区 NGF nerve growth factor 神经生长因子 BDNF brain-derived neurotrophic factor 脑源性神经营养因子 VEGF vascular endothelial growth factor 血管内皮生长因子 EGF epidermal growth factor 表皮生长因子 TGF-β transforming growth factor 转化生长因子-β glial cell line-derived neurotrophic GDNF 胶质细胞源性神经营养因子 factor NTFs neurotrophic factors 神经营养因子 bFGF 促进 HIE 新 生仔鼠内源性神经 干 细胞增殖和分化实验研究 中文摘要 目的：探讨腹腔注射碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对缺氧缺血性脑病(HIE) 模型新生仔鼠的影响。 方法：选孕 20 日 SD 大鼠 13 只随机分为实验组 10 只和对照组 3 只，实验组孕 鼠打开腹腔结扎双侧子宫动脉 15 分钟，自然分娩，所分娩为宫内全脑缺氧缺血 损伤模型组小鼠，对照组组同样打开腹腔但不结扎动脉，自然分娩；实验组仔鼠 出生后 3 日随机分为碱性成纤维细胞生长因子组（bFGF 组，n=22）、生理盐水 组（NS 组，n=20），对照组做为正常对照（n=15）；bFGF 组腹腔注射 bFGF 20 ug/kg/d + BrdU 50 mg/kg/d 连续 7 天，NS 组和对照组注射等剂量的 NS 和 BrdU 同样 7 天，监测新生仔鼠 D1-D10 体重，死亡率，观察行为、形态变化；分别在仔鼠出 生第一天和注射药物后一周灌注取脑，石蜡包埋切片，行 HE 染色观察神经元形 态变化；在各组注射药物后第 2 周，行 TUNEL 法检测大脑皮层和海马区神经元 的凋亡；分别在各组注射药物后第 1、2、4 周三个时间点行免疫组化法检测各组 皮层区和海马齿状回巢蛋白（Nestin）、5-溴脱氧尿苷（BrdU）、胶质纤维酸性蛋 白质（GFAP）及神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达；免疫荧光-激光共???焦 法观察 BrdU/Nestin、BrdU/GFAP 及 BrdU/NSE 的共定位表达。对照组与实验组 做同期对照，统计学处理。 结果：实验组胎鼠总数 76 只，出生时活产鼠 51 只（胎死率 32.9% ），3 日龄时， 活鼠剩余 42 只，死亡率 44.7%，对照组仔鼠无死亡。实验组新生仔鼠行动笨拙， 喂养困难，鼠毛稀疏，四肢肌张力偏高。对照组体重增长快，NS 组增长缓慢， bFGF 组增长较快；免疫组化显示同周龄各组大鼠中对照组 BrdU、Nestin、NSE、 GFAP 阳性细胞最少，bFGF 组较 NS 组阳性细胞表达增加，组间两两比较具有 统计学意义（P0.05）；共聚焦结果显示 BrdU 与 Nestin、NSE、GFAP 在大脑皮 层与海马等部位有共定位表达，皆以 bFGF 组表达量最高，对照组最少；HE 染 色 NS 组细胞数减少、结构排列紊乱，胶质细胞增生，bFGF 组细胞排列较整齐， 数目较多；对照组细胞排列整齐，形态正常；TUN EL 染色结果显示 NS 组凋亡 神经元数目最多，bFGF 组较少，对照组最少，组间两两比较有统计学意义（P ＜0.05）。 结论：产前结扎孕鼠双侧子宫动脉成功制备宫内缺氧缺血模型可以很好地模拟 HIE，bFGF 能促进 HIE 新生仔鼠内源性 NSCs 增殖，减轻神经功能损害。 关键词：新生仔鼠，缺氧缺血性脑损伤，碱性成纤维细胞生长因子，内源性神 经干细胞 bFGF protects the neonatal brain from hypoxic-ischemic encephalopathy via promotin