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2018-05-18 发布于上海
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ataxin3对parkin c289g的作用及其与去泛素化酶活性的关系word格式论文.docx

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ataxin3对parkin c289g的作用及其与去泛素化酶活性的关系word格式论文

目录Ataxin-3 对 Parkin （C289G）的作用及其与去泛素化酶活性的关系…4 中文摘要………………………………………………………………………4 ABSTRACT…………………………………………………………………6 英汉缩略词对照表…………………………………………………………9 前言…………………………………………………………………………10 1 材料与方法………………………………………………………………131.1 实验材料与仪器………………………………………………… 131.2 实验方法……………………………………………………………141.3 统计方法……………………………………………………………162 结果 ………………………………………………………………………172.1 Parkin 在 HEK293T 细胞中的亚定位及与线粒体的共定位……172.2 Ataxin-3 与 Parkin 突变型（C289G）在 HEK293T 细胞中的共定位……182.3 Parkin 突变型（C289G）与线粒体在 HEK293T 细胞中的共定位……213 讨论 … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … 2 53.1 帕金森疾病的发病机制的探讨………………………………………25 3.2 野生型和 PolyQ 突变型 ataxin-3 蛋白对突变型 Parkin（C289G）蛋白细胞质聚集倾向的影响及其与去泛素化酶活性的关系…………………27 3.3 野生型和 PolyQ 突变型 ataxin-3 蛋白对突变型 Parkin（C289G）蛋白线粒体分布的影响及其与去泛素化酶活性的关系………………………28 4 结论 ………………………………………………………………………31 参考文献……………………………………………………………………32 综述…………………………………………………………………………37 攻读学位期间发表的学术论文目录………………………………………49 致谢…………………………………………………………………………50Ataxin-3 对 Parkin （C289G）的作用及其与去泛素化酶活性的关系中文摘要目的：观察野生型和 PolyQ 突变型 ataxin-3 蛋白对突变型 Parkin（C289G）蛋白细胞质聚集倾向和线粒体分布的影响及其与去泛素化酶活性的关系。方法：.应用免疫荧光-激光共聚焦技术观察野生型或 PolyQ 突变型 ataxin-3 蛋白对突变型 Parkin（C289G）蛋白在细胞质中聚集的影响及其与去泛素化酶活性的关系；.应用免疫荧光-激光共聚焦技术观察野生型或 PolyQ 突变型 ataxin-3 蛋白对突变型 Parkin（C289G）蛋白向线粒体转移能力的影响及其与去泛素化酶活性的关系。结果：1. 免疫荧光 - 激光共聚焦结果显示无论是在共转 ataxin-3-Q22 或 ataxin-3-Q68 与 Parkin 突变（C289G）组，还是共转 ataxin-3-Q22-C14A 或 ataxin-3-Q80-C14A 与 Parkin 突变（C289G）组，ataxin-3 都能与 Parkin 突变（C289G）共定位,说明 ataxin-3 与 Parkin 突变（C289G）之间可能有相互作用。2. 免疫荧光显示突变的 Parkin（C289G）蛋白在细胞质中出现显著聚集，而共转 ataxin-3-Q24 或 ataxin-3-Q68 和 Parkin 突变（C289G），Parkin 突变（C289G）蛋白聚集体数量均明显减少(P0.05)，且 ataxin-3-Q24 作用更为明显(P0.05)，说明无论是 ataxin-3-Q24 还是 ataxin-3-Q68 均显著抑制了 Parkin 突变（C289G）的聚集，而 ataxin-3-Q24 的作用更为明显。3.当 ataxin-3 发生 C14A 突变后，共转 ataxin-3-Q22-C14A 或转 ataxin-3-Q80-C14A 与 Parkin 突变（C289G），Parkin 突变（C289G）蛋白聚集体数量较 C14A 突变前均有所增加 (P0.05)，说明当 ataxin-3 C14A 点突变后，无论是 ataxin-3-Q22-C14A 还是 ataxin-3-Q80-C14A 对 Parkin 突变（C289G）蛋白聚集体的抑制作用均明显减弱。4. 免疫荧光-激光共聚焦结果显示，在加线粒体去极化剂 CCCP 12 小时后，Parkin 突变（C289G）无明显线粒体分布倾向，而在共转 ataxin-3-Q24 或 a