(杀菌剂)生物测定.pptVIP

杀菌剂生物测定方法 第二章杀菌剂毒力测定 Evaluation of Fungicide Toxicity  ? 第二章 杀菌剂毒力测定 绪论 第二章杀菌剂毒力测定 杀菌剂生物测定(bioassay of fungicide) 利用病原菌或感菌生物体对杀菌剂的反应,来确定杀菌剂效力的农药生物测定. 简史 1907年福尔克(D.Falck)在研究木材防腐发现,真菌在固体培养基上生长速率与时间成直线关系。这个发现后来成为测定杀菌剂毒力的标准方法之一。 1930年麦卡兰(S.EA.McCallan)发表关于杀菌剂室内测定方法的论文,为近代杀菌剂的测定方法开了道路。 第二章杀菌剂毒力测定 简史(续) 1939年伯林罕姆(E M.Burlinglume)和雷迪什(G.F-Reddish )发明抑菌圈法,以测定杀菌剂的毒力,至今仍为抗菌素效价测定的标准方怯。 1943年美国植物病理学会发表了杀菌剂毒力测定的孢子萌发法。近几十年来随着生物科学和各种测试手段的进展,杀菌剂生物测定技术也有很大发展。像种子消毒剂、土壤消毒剂的测定方法,果实防腐剂以及幼苗接种、叶片接种等活体测定方法已被广泛应用。 第二章杀菌剂毒力测定 第二章杀菌剂毒力测定 二、毒力测定方法（离体实验） 就是利用供试菌直接接触药剂来测定其毒力的方法 。 二、毒力测定方法（离体实验） 就是利用供试菌直接接触药剂来测定其毒力的方法 。 二、毒力测定方法（离体实验） 二、毒力测定方法（离体实验） 二、毒力测定方法（离体实验） 二、毒力测定方法（离体实验） 二、毒力测定方法（离体实验） 二、毒力测定方法（离体实验） 菌体生长速率测定法(mycelium growth rate test) 二、毒力测定方法（离体实验） 菌体生长率测定方法及步骤（续） 二、毒力测定方法（离体实验） 菌体生长速率测定方法及步骤（续） 二、毒力测定方法（离体实验） 菌体生长速率测定方法及步骤（续） 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 三、室内药效测定(活体) 谢谢！ 二、毒力测定方法 水平扩散法（常用方法） 2.滤纸片法 操作步骤是：与管碟法不同处在于将药液定量地滴加在小滤纸片上(直径1一8mm) 。晾干，放于带菌的培养基上,,测定抑菌圈直径。 特 点：精确度较高,用药量少,操作较简便,应用面广 3、注意的问题 （1）一般的毒力测定对菌种要求不严, 有抑菌圈均可。但定量测定时,菌株 滤纸片法 二、毒力测定方法 水平扩散法（常用方法） 3、注意的问题 要敏感，抑菌圈界限明显易培养,生长快,不易污染菌种有较强的抗热性。 （2）固体培养基均可,但其组分、pH值与抑菌圈的大小、边缘有关 （3）药量一致，药剂应呈溶解状态，不溶于水的药剂应用酒精、丙酮或其它适当溶剂溶解,然后加水稀释成所需浓度。 二、毒力测定方法 其它测定方法 1、附着法 是将病菌孢子附着于灭菌的种子、滤纸片、果皮或其他保护材料上,使其接触药剂, 培养，有无菌丝生长？比较药剂。主要有2种： ?滤纸片附着法 一般是将直径6毫米的小滤纸片进行干热灭菌后,在其上滴加1-2滴孢子悬浮液,再将其在药液中浸泡数分钟,用镊子夹取并振落多余药液, 放于培养基上, 培养2-3日观察有无菌丝生长；也可将1毫升药液与10毫升培养基混合,凝固后放上含菌的滤纸片, 培养2-3日,观察,比较毒力大小 二、毒力测定方法 其它测定方法 1、附着法 ?种子附着法 选种,去种皮, 灭菌；将病菌孢子液与种子混合,除余水分, 培养1-4天, 干燥；将带菌种子放入一定浓度的药液中, 捞出，置滤纸上,再放入水洋菜培养基上,显半埋状，每皿5粒，培养7天；观察分析 2、稀释法 在培养基（固液）,加入含有一系列浓度的药剂,分别注入平养,其中接种供试菌，培养，观察病菌生长，使病菌发育完全停止的最低浓度定为指标,这种测定方法叫做稀释法。 二、毒力测定方法 其它测定方法 3、气体效力测定法 ?适用于挥发性药剂，测定其熏蒸效果。方法：在培养基上接菌, 在盖内放药,将皿倒置,调查，在适温下培养，测定。也可以在一个大的容器内试验测定。 注意 要严防漏气，培养皿和玻璃罩或筒等要密闭。 ? 又称间接法、活体测定方法、温室盆栽试验等。都是根据寄主发病与否和发病轻重,间接判断药剂杀菌效果的方法。 主要方法及内容 鲜叶孢子萌发试验法 叶片接种试验法 幼苗接种试验法