21.2.1_动物细胞培养和核移植技术［41张ＰＰＴ］.ppt

动物细胞工程常用的技术： 动物细胞培养 动物细胞核移植 动物细胞融合 单克隆抗体 等 自主阅读P44第5段，思考下列问题： 1、什么叫动物细胞培养（animal cell culture)？ 2、动物细胞培养的原理是什么？ 一、动物细胞培养 学习活动一： 合作学习（结合问题思考流程） 细胞贴壁 有关概念： 原代培养：通常将直接从动物体内取出的动物组织消化后的初次培养称为原代培养。 传代培养：原代培养的细胞出现接触抑制后，贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖。这样即为传代培养。 分类：10代内的细胞；10-50代；50代以后。 问题探讨： 3、动物细胞培养的条件 动物细胞培养条件： 1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液） 2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4 4、气体环境： O2和CO2（95%空气和5% CO2 ） 4、动物细胞培养技术的应用 根据动物细胞核仍具有全能性的特点,怎样将动物细胞的全能性表达? 二、动物体细胞核移植技术 1、概念：将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育成动物个体。 用核移植的方法得到的动物称克隆动物 2、核移植的种类 胚胎细胞核移植 体细胞核移植 学习活动三：思考探究 1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达的奶牛，年产奶量为30.8t，创造了世界奶牛产奶量的最高记录。目前世界各国高产牛奶场的奶牛，平均每年产量为十几吨，而我国平均水平仅有3－4吨。 你能想办法繁殖卢辛达的后代，使年产奶量为30.8t吗？ 4、应用前景： 5、存在问题： ① 成功率低 ② 克隆动物存在健康问题 ③ 克隆动物食品的安全性问题存有争议 1、动物细胞培养的过程： 问题 思考题 思考题 思考题 ① 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育 ② 保护濒危物种，增加存活数量 ③ 克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 ④ 可以作为异种移植的供体 ⑤ 可以用于组织器官的移植 从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙的去核卵母细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再将胚胎移到另一只母羊丙的子宫内，出生的小羊大多数性状 A. 难以预测 B. 像甲 C. 像乙 D. 像丙 练一练~~~ 2 .下列有关克隆的叙述，不正确的是 A.生物体通过体细胞进行的无性繁殖 B.将某种瘤细胞体外培养繁殖成大量细胞 C.扦插和嫁接实质上也是克隆? D.将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA中 练一练~~~ 幼龄动物 取动物器官 和组织 剪碎组织 胰蛋白酶处理 细胞培养 单个细胞 加培养液 细胞悬液 10代细胞 原代培养 50代细胞 传代培养 无限传代 遗传物质未改变 遗传物质已改变 1、动物细胞培养的过程： 1、植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ ２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的吗？ ３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？ ４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？ ５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？ 没有 是 成块的组织细胞靠在一起,彼此限制了细胞的生长和增殖 先用剪刀剪碎,后用蛋白酶处理 胰蛋白酶水解蛋白质 细胞间的成份是蛋白质(胶原蛋白等) ６、细胞膜的主要成份是什么？ ７、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？ ８、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？ ９、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？ 10、动物细胞培养取材时，一般是取胚胎组织或幼龄动物的组织或器官，请解释原因？ 蛋白质和磷脂 能 注意时间的控制 不能，因为两者的最适PH不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近 胚胎组织或幼龄动物的组织或器官分裂、增殖旺盛 11、贴附性细胞培养瓶内表面为何要光滑、无毒？ 12、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？ 13、如果此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？细胞株和细胞系通常是培养多少代的细胞? 易于培养细胞贴壁，进行生长增殖 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。 将贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。这样的过程叫做传代培养 14、如何理解原代培养和传代培养？ 15