第11章 分光光度法.ppt

11.1 物质对光的选择性吸收 单色光 具有同一波长的光 复合光 不同波长光组成的混合光 互补光 透射光与吸收光组成白光， 称为互补色光 物质的颜色 对不同波长的光选择性吸收 溶液的颜色 被吸收光色的互补色 吸收曲线  入射光强度 I0 透射光强度 I 吸收光强度 Ia I0= I + Ia 11.2 光吸收定律 1.Lambert-Beer定律 一束平行单色光通过有色溶液时，溶液的吸光度A与液层厚度L和溶液浓度c的乘积成正比。 --------Lambert -Beer定律 e molar absorptivity e 表示吸光物质浓度为1mol/l,液层厚度为1cm时溶液的吸光度. e 值越大，溶液的吸光能力越强， 显色反应的灵敏度越高. e 是吸光物质在特定波长下的特征常数 e 值是选择显色反应的重要依据. 例1：浓度为0.51mg/ml的Cu2+溶液,用双环己酮草酰二腙光度法测定.在600nm波长处用2cm比色皿测得A=0.297.求e , a. 2. Lambert-Beer定律的偏离 A=e Lc 11.3 分光光度分析的方法和仪器 1.测定方法 1）目视比色法 2）分光光度法 定量方法 标准曲线法 标准比较法 As/Ax=Cs/Cx 2.分光光度计 1.光源 2.单色器 3.吸收池 4.检测系统 5.信号显示系统 例2:用浓度为0.100mg Mn/ml的KMnO4标准溶液.以1cm比色皿在520nm波长处测得该溶液吸光度A为0.500,今取含Mn未知液10.00ml,氧化为MnO4-后,定容至50.00ml,在相同条件下测得A=0.300.求未知液Mn的浓度. 11.4 显色反应和显色条件 1.显色反应 1).灵敏度高. Cu~NH3 e 620=1.2×102 Cu~双硫腙 e 533=5.0×104 2).选择性好 3).显色产物组成恒定,性质稳定. 4).显色产物与显色剂色差大,显色 时颜色变化明显.试剂空白值小. 2.显色条件 1)显色剂的用量 M + R = MR (被测组分) (显色剂) (有色化合物) 2)酸度 pH 2~3 [Fe(Ssal)]+ pH 4~7 [Fe (Ssal)2]- pH 8~10 [Fe(Ssal)3]3- pH12 Fe(OH)3 11.5 吸光度测量条件的选择 1.入射光波长 1)通常选择lmax 2) lmax处有干扰时,选择干扰最小,吸光度尽可能大的波长进行测量. 2. 吸光度读数范围 3.参比溶液(空白溶液) 测定：空白溶液调节仪器A=0(T =100%),以消除溶液中其它物质的干扰,抵消比色皿对光反射、吸收. 1)溶剂参比 试液、试剂、显色剂均无色(无吸收) 溶剂如纯水作参比溶液 2)试剂参比 试液无色, 显色剂或其它试剂有色(有吸收) 3)试液参比 试剂、显色剂均无色(无吸收),试液中其它组分有色, 则应采用不加显色剂的试液作参比溶液. 选择参比溶液的总原则是:使试液的吸光度能真正反映待测组分的浓度 * * 第十一章 分光光度法 Spectrophotometry 吸收光谱分析 Analysis of Absorption Spectroscopy 吸光光度法是以物质对光的选择性吸收为基础的分析方法. 可见光区(400-750 nm) 的吸光光度法 硫酸铜溶液，吸收黄光 呈现蓝色. 青蓝 白光 绿 青 蓝 紫 红 橙 黄 光的互补色示意图 高锰酸钾溶液，吸收 绿光, 呈现紫色。 I0 I 溶 液 透光度 T T = I / I0 吸光度 A A= - lg T = lg