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专题3.2 月季的花药培养(讲)-2017-2018学年高二生物同步精品课堂(提升版)(选修1)(原卷版)
选修1专题3课题2月季的花药培养(讲) 一、被子植物的花粉发育 【知识点讲解】 1.雄蕊 花药(囊状结构,内有很多花粉)和花丝。 2.花粉 花粉的产生:由花粉母细胞(小孢子母细胞)历经减数分裂、有丝分裂而形成,是单倍体的生殖细胞。 3.被子植物花粉的发育过程 小孢子母细胞→小孢子四分体时期→单核期→双核期→花粉粒 【典型例题】 下列有关月季花药培养的叙述错误的是( ) A. 月季花粉是由花粉母细胞经过减数分裂而形成的单倍体生殖细胞[来源:学科网ZXXK] B. C. 月季花粉的一个小孢子母细胞经过分裂共形成8个精子 D. 花药培养初期不需要光照,幼小植株形成后才需要光照 二、产生花粉植株的两种途径 【知识点讲解】 1.产生花粉植株(即单倍体植株)的两种途径:一是花粉通过 胚状体 阶段发育为植株,二是通过愈伤组织阶段发育为植株。这两种途径的区别主要取决于培养基中激素的种类及其浓度的配比。 【特别提醒】 两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。 2.体细胞胚(胚状体):在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。 【典型例题】 如图是花药培养产生花粉植株的两种途径,下列相关判断错误的是( ) A.图中的a是愈伤组织 B.①和②过程的实质相同 C.选择的花药在花粉发育过程中越早越好 D.整个培养过程中的细胞增殖方式只有有丝分裂 三、影响花药培养的因素 【知识点讲解】 1.材料的选择 ①从花期来看,应当选择初花期的花药,因为花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季的初花期。[来源:学科网ZXXK] ②从花粉来看,应当选择单核期的花粉,这时花药培养成功率最高。 ③从花蕾来看,应当选择完全未开放的花蕾。挑选到单核期的花药,通常选择完全未开放的花蕾。盛开的或略微开放的花都不易选做实验材料。 2.其他影响因素 讲解其他影响因素,强调材料的选择和培养基的组成是主要影响因素。 (1)培养基的组成 (2)亲本生长条件、材料低温处理、接种密度等 生长旺盛植株花药较易形成花粉植株;栽培条件的好坏也影响花粉植株的诱导率。 (3)适宜的培养条件等 25℃左右,花粉培养的早期,黑暗或弱光有利于花粉分裂的启动。 【典型例题】 关于影响花药培养的因素的说法,不正确的是( )A. 材料选取和消毒是花粉植株诱导成功的关键B. 选择盛开的或略微开放的花作实验材料C. 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理、接种密度都对实验有影响D. 应选择完全未开放的花蕾作实验材料 【知识点讲解】 (一)材料的选取 (1)醋酸洋红法(最常用方法) ①醋酸洋红的配置 将体积分数45%的醋酸100ml煮沸,缓缓加入1g洋红,在加热回流8h,冷却至50℃,过滤即可。 ②染色操作 将花药放在载玻片上,加一滴质量分数1%的醋酸洋红,用镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片在显微镜下检查。 (2)焙花青-铬矾法 ①卡诺氏固定液的配制方法 将无水酒精与冰醋酸按体积比为3:1的比例混匀。 ②焙花青—铬钒溶液的配制方法 将5g铬明矾[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸馏水中,溶解后加入0.1g焙花青,混匀并加热至沸腾,煮沸5分钟后冷却至室温,过滤,加蒸馏水定容至100ml。 ③染色操作 花药应该在卡诺氏固定液中固定20min,然后取出放在载玻片上,加焙花青—铬钒溶液染色,盖上盖玻片后在显微镜下检查。 (二)材料的消毒 1. 将花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30s 2. 无菌水清洗 3. 无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分 4. 放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中 2~4min(也可质量分数为1%的次氯酸钙 溶液或饱和漂白粉溶液) 5. 无菌水冲洗3~5次 (三)接种和培养 (1)剥取花药 在无菌条件下除去萼片和花瓣用镊子取出花药。 (2)接种 立即将花药接种于培养基上,通常每瓶接种花药7-10个。 (3)培养 ①培养条件: 温度控制在25℃左右,不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。 ②培养: 一般经过20-30天培养后,会发现花药开裂,长出愈伤组织或释放出胚状体长出,愈伤组织则将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株。 (4)鉴定和筛选 在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化(主要原因是营养核和生殖核融合造成的),需要进一步鉴定和筛选。 【典型例题】 如图表示被子植物花粉的发育过程,据图完成下列问题。 利用月季的花药离体培养产生单倍体时,选材非常重要。一般来说,在__________________期花药培养的成功率最高。为了选
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