高效液相色谱法123精品.pptVIP

* * * 流动相的性质和选择 1、流动相的物理性质 1)流动相要求： ①易得易纯化，无毒不易燃。 ②检测器的适应性:如紫外检测器对 溶剂的透明波长要求；示差折光不能 用梯度洗脱 ③对样品有一定溶解度而不反应 ④纯净,低廉,低粘度(5×10-4Pa.S), 低沸点(柱温(20~50)) * 2)流动相的物理性质 沸点bp、分子量M、密度、介电常数e 粘度η、折射率RI、紫外吸收截止波长 溶剂强度参数ε(Al2O3)、溶解度参数 δ(色散δd、取向极性δ0、受质子δa 给质子δh)、溶剂极性参数P/ (质子接 受xe、给质子xd、偶极xn)、选择性分 组、表面张力、离子对色谱溶剂强度 (P/+0.25e) * 常用于HPLC流动相溶剂的性质 溶剂 P/ ε Xe Xd Xn 选择 全氧烃 -2 0.25 正戊烷 0 0 正已烷 0.1 0.01 正庚烷 0.2 0.01 环已烷 -0.2 0.04 四氯化碳 1.6 0.18 苯 2.7 0.32 0.23 0.32 0.45 7 甲苯 2.4 0.29 0.25 0.28 0.47 7 乙醚 2.8 0.38 0.53 0.13 0.34 1 二氯甲烷 3.1 0.42 0.29 0.18 0.53 5 正丙醇 4.0 0.82 0.54 0.19 0.27 2 * 正丁醇 3.9 0.7 0.59 0.19 0.25 2 四氢呋喃 4.0 0.57 0.38 0.20 0.42 3 乙酸乙酯 4.4 0.58 0.34 0.23 0.43 6 氯仿 4.1 0.40 0.25 0.41 0.33 7 甲乙酮 4.7 0.51 0.35 0.22 0.43 7 二氧六烷 4.8 0.56 0.36 0.24 0.40 6 吡啶 5.3 0.71 0.41 0.22 0.36 3 硝基乙烷 5.2 0.60 0.28 0.29 0.43 7 丙酮 5.1 0.50 0.35 0.23 0.42 6 乙醇 4.3 0.88 0.52 0.19 0.29 2 乙酸 6.0 1.0 0.39 0.31 0.30 4 乙腈 5.8 0.65 0.31 0.27 0.42 6 DMF 6.4 0.39 0.21 0.40 3 二甲亚砜 7.2 0.75 0.39 0.23 0.39 3 甲醇 5.1 0.95 0.48 0.22 0.31 2 硝基甲烷 6.0 0.64 0.28 0.31 0.40 7 乙二醇 6.9 1.11 0.43 0.29 0.28 4 甲酰胺 9.6 0.36 0.33 0.30 4 水 10.2 0.37 0.37 0.25 8 * ①溶剂的强度因素ε,P/ 规定：戊烷在Al2O3的ε=0 ε(硅胶)=ε(Al2O3)×0.77 混合溶剂 ? N摩尔分数;nB为吸附剂吸一个B分子所占面积,β吸附剂 活性。一般0.6≤β≤1.0, nB=4-6随B分子体积而变化 * * * ε0：液-固色谱中溶剂强度参数，反 映溶剂分子对吸附剂亲和力。 经验：ε0减小0.05，k值增加1~3倍 ②溶解度参数δ EC是1mol气体变液体释放能量; Vm液体摩尔体积 δ=色散δ+偶极δ+接受质子δ+给出质子δ * ③极性参数P/ Kg为极性分配系数 P’:液-液色谱溶剂极性参数，表示溶 剂洗脱强度和溶剂的选择性 经验：P’改变2单位，k值改变10倍 * 极性参数P与溶剂强度参数关系[投影] 溶剂 P Xe Xd Xn 溶剂 P Xe Xd Xn 正戊烷 0 乙醇 4.3 0.52 0.19 0.29 正已烷 0.1 乙酸乙酯 4.4 0.34 0.23 0.43 苯 2.7 0.23 0.32 0.45 丙酮 5.1 0.35 0.23 0.42 乙醚 2.8 0.53 0.13 0.34 甲醇 5.1 0.48 0.22 0.31 二氯甲烷 3.1 0.29 0.18 0.53 乙腈 5.8 0.31 0.27 0.42 正丙醇 4.0 0.54 0.19 0.27 乙酸 6.0 0.39 0.31 0.30 四氢呋喃 4.0 0.38 0.20 0.42 水 10.2 0.37 0.37 0.25 氯仿 4.1 0.25 0.41 0.33 * ④粘度参数 注意:溶剂常用0.4-0.5mPa.s,太大柱 效下降,大小易成气泡,混合时一般粘 度变化非线性 1 2 3 4 水0 B100 1.正丙醇 2.乙醇 3.甲醇 4.乙腈 * 2、溶剂的选择性与分类(Snyder) K与分子之间作用力？ 色散力、偶极力、氢键力 * 参考物的选择 (Snyder法) 强偶极作用------硝基甲烷-------Xn 质子给予体------乙醇---------