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细胞生命活动之
--细胞凋亡、细胞周期;
细胞凋亡( Apoptosis)概念;细胞凋亡生理意义;细胞凋亡与疾病;细胞凋亡多事件发生;1 细胞凋亡之细胞膜事件;细胞凋亡之细胞膜事件;细胞膜变化的检测:Annexin V/PI;FAQ常见问题回复;3 当样本表达GFP(绿色荧光蛋白),还能使用Annexin-FITC吗?
;4.贴壁细胞酶消化,应注意哪些事项?
0.25%胰酶消化:过渡消化损伤细胞,可在消化时加2%BSA防过渡消化
胰酶含EDTA(钙离子螯合剂):标记Annexin V前用1xPBS或1xbinding buffer洗脱,清除EDTA,以免螯合钙离子,影响Annexin V结合
5. 是否与细胞表面标记兼容?
只要Ca离子不影响该表面Marker就可以同时做
PI的问题
;2 细胞凋亡之线粒体;产品编号;线粒体事件;流式检测结果;优点:操作简单,试剂直接加入细胞中,20分钟后检测;3细胞凋亡之 caspase检测;名称;产品编号;细胞凋亡之 caspase-3; Jurkat T-Cells Mouse Thymocytes;产品编号;4细胞凋亡之 核内DNA事件;细胞凋亡之 核内DNA事件;细胞凋亡之 核内DNA事件;Tunel方法;Tunel方法;*;产品编号;不同时期凋亡的检测指标的选择
早期:Annexin V
早中期:Cytochrome C 和线粒体相关
中晚期:Caspase-3, 8, 9, other proteins
晚期:DNA Fragment;检测水平
细胞
核酸
细胞膜
胞内通路
线粒体;细胞凋亡之总结篇;
;2.1细胞周期;
利用特殊的荧光染料(PI等)与细胞内DNA碱基结合,被这些荧光染料染色的细胞在激光照射下发射出荧光,荧光强度与DNA含量成正比。流式细胞仪通过测定细胞的荧光强度推算出细胞的DNA含量。;细胞周期的样本制备;细胞周期样本检测;细胞周期样本检测;DNA检测的常用术语;结果分析;结果分析;正常细胞周期分析;肿瘤组织中的各种DNA倍体;细胞周期与肿瘤;研究药物对细胞周期的影响
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