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涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作? 答:应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 三、课题成果评价 (一)培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2 d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 (二)接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 (三)是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。 菌种的保存 1.临时保藏: 接种到固体斜面培养基,菌落长成后置于4℃冰箱保存。 2.长期保存: 甘油冷冻管藏法 编号 成分 含量 ① 粉状硫 10g ② (NH4)2SO4 0.4g ③ K2HPO4 4.0g ④ MgSO4 9.25g ⑤ FeSO4 0.5g ⑥ CaCl2 0.5g ⑦ H2O 100ml (1)右表培养基可培养的微生物类型是________________。 (2)若不慎将过量NaCl加入培养基中。如不想浪费此培养基,可再加入 。 自养型微生物 含碳有机物 例3.右表是某微生物培养基成分,请据此回答: (3)若除去成分②,加入(CH2O),该培养基可用于培养 。 (4)表中营养成分共有 类。 (5)不论何种培养基,在各种成分都溶化后分装前,要进行的是 。 (6)右表中各成分重量确定的原则是 。 (7)若右表培养基用于菌种鉴定,应该增加的成分是 。 固氮微生物 3 调整pH 依微生物的生长需要确定 琼脂(或凝固剂) 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 1.培养基的种类和成分。(重点) 2.无菌操作技术的方法。 3.制备培养基的步骤和注意事项。 4.平板划线法和稀释涂布平板法的步骤和注意事项。(重点、难点) 微生物的实验室培养 思考: 微生物就是细菌吗? 微生物 原生动物 特点:结构都相当简单,个体多数十分微小。通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到,有的甚至没有细胞结构。且体内一般不含有叶绿素,不能进行光合作用。 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 病毒 细菌 放线菌 真菌 微生物培养的实质是什么?需要什么培养条件? 思考: 实质: 培养条件: 微生物的生长繁殖。 营养物质、pH、温度、无菌环境等。 人们按照微生物对 的不同需求,配置出供其 的营养基质称培养基。 碳源、氮源、无机盐和水等 2.培养基的成分 生长繁殖 营养物质 pH、特殊营养物质、氧气、维生素 ①主要成分: ②其他成分: 1.培养基的概念 培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 1.连线表示下列成分所提供的主要营养: Q:与植物组织培养培养基的区别? 2.连线完成其他培养基的特殊需求: 3.培养基的种类 液体培养基 固体培养基 在液体培养基的基础上再添加琼脂。 液体培养基: 表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长 固体培养基:菌落 培养基的种类 液体培养基 半固体培养基 固体培养基 据物理性质分 天然培养基 合成培养基 据化学成分分 选择培养基 鉴别培养基 据用途分 常用于工业生产 常用于观察微生物的运动、鉴定菌种 用于微生物的分离、计数 常用于工业生产 常用于分类、鉴定 在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长。例如,在培养基中加入青霉素,以抑制细菌、放线菌的生长,从而分离到酵母菌和霉菌。又如,在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长,但不影响金黄色葡萄球菌的生长。 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成,用以鉴别不同种类的微生物。例如,在培养基中加入伊红和美蓝,可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌:如果有大肠杆菌,其代谢产物就与伊红和美蓝结合,使菌落呈深紫色,并带有金属光泽。 选择培养基 加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌 加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌 不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自
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