电位分析法临床医学八年制幻灯片.pptVIP

敏化电极 气敏电极　由离子选择性电极与参比电极组成的复合电极 如由pH玻璃膜电极外加一层透气膜组成氨电极 酶电极　将酶固定在胶层中，再履盖在离子选择性电极敏感膜外面组成的电极。　能对某一特定的基质具有选择性，能响应反应过程中某一组分的活度变化。 将脲酶固定在氨电极上制成脲酶电极，可测定血中尿素。 CO(NH2)2 + H3O+ +H2O 2NH4+ + HCO3- 可用氨电极测定反应生成的NH4+。 中介液中 因中介液中c(NH4+) 大，可视为不变，因此，玻璃膜电极的电势为： 脲酶 氨电极构造示意图 参比电极 中介液 (0.1mol·L-1NH4Cl) 敏感膜 电极头 电极管 内参比液 透气膜 pH玻璃膜电极 内参比电极 酶电极结构示意图 酶基体层 离子选择剂膜 内参比液 内参比电极 组织电极(tissue based membrane electrodes) 　以动植物组织代替酶作为生物膜材料所构成的电极 组　织 测定对象 使用指示电极 猪肝 谷氨酰胺 NH3 免肝 乌嘌啉 NH3 黄瓜 谷氨酸 CO2 大豆 尿素 NH3 、CO2 香蕉肉 多巴胺 O2 1.组织中含有大量酶，2.组织中的酶稳定，功效强，电极寿命长，3.　组织适于制膜，有机械强度。 直接电位法 方法一：标准对照测量法 由SCE，离子选择电极和待测溶液组成电池 　　分别测定浓度为CS的标准溶液和浓度为CX的待测溶液的电池电动势ES、EX，相减得： 代入CS值，解出CX。 测阳离子，取“－”号；测阴离子取“＋”号。 氟离子选择电极测定F－ E＝(EAgCl/Ag＋ΔELaF3膜)－ ESCE＋ΔEL＋ΔE不对称 Hg|H2gCl2|KCl(饱和)|试液||LaF3膜|NaF,NaCl,AgCl|Ag 方法二：标准曲线法 lgai E/mV 操作步骤： 测定被测离子系列浓度标准溶液和参比电极的电动势ES，作E－lgc 标准曲线。 　　为保证γ不变，加入总离子强度调节缓冲液TISAR(Total ionic strength adjustment buffer) 测F－时，NaCl 0.1、HAc 0.25、NaAc 0.75、柠檬酸钠　0.001mol·L-1，pH5.0 I=1.75。 在同样条件下测定试样溶液的EX，在标准曲线上查出与EX相对应的CX lgci Ex c 方法三　标准加入法 被测试液成分复杂、离子强度大时采用标准加入法 取一份待测试液，测得电动势E1 往此试液加入浓度是其100倍，体积约为1/100的标准溶液 　　两次测定在同一体系中进行，Ej、γ、x等影响因素相同。 令： 则： 测定时，CS、V0、VS必须准确测量，并控制△E≈20～50mV 优点：不需系列标准溶液，不需加TISAR，操作简便快速。 测得电动势E2，忽略体积变化 思考题：推导考虑体积变化的计算公式。 x1 　游离（未配位）离子的摩尔分数。 方法四　格氏(Gran)作图法 在V0mL试液中，加入不同体积Vs的标准溶液，分别测定E，以(V0+Vs)10E/S为纵坐标，Vs为横坐标作图得一直线，延长直线与横坐标轴相交得Vs(负值)。 Vs (V0+Vs)10E/S 因(V0+Vs)10E/S=0，则k(cxV0+csVs)=0 空白 试样 空白试验　不加样品按同样操作 进行的试验，可以校正试剂等引起的误差。 用半对数格氏坐标纸作图法 E/mV -4 -2 0 2 4 6 8 10 Vs/mL 规定V0＝100mL，Vs=0－10mL，考虑10%稀释效应的半对数格氏坐标纸如图。横坐标1mL·格-1，纵坐标5mV·格-1. 空白 试液 取水样50.00mL，加TISAB溶液稀至100mL，每次加入1.0×10-3 mol·L-1F-标准溶液1mL，共4次，同样方法作空白试验,结果如下： 　　　0 1 2 3 4 E试样 –192 –177 –167 –161 –155 E空白 –269 –197 –181 –171 –164 Vs空白=-0.01mL，Vs试样=-0.07mL 注意 1.　若V0为100mL的A倍，横坐标上每大格应变为AmL 2.　纵坐标为10nE/S，一价离子取S=58mV，每大格代表5mV，二价离子的S=29mV，就将测得的电动势乘2。 3.　空白试验的目的是消除电极的斜率误差和试剂空白。 　作图法实为多次标准加入法，麻烦，但可提高准确度