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农药残留酶抑制法操作指引-厦门斯坦道科学仪器股份有限公司
农药残留酶抑制法操作指南 厦门斯坦道科学仪器股份有限公司 1 Xiamen Standards Scientific Instrument Co.,Ltd 农药残留检测 •酶抑制法--蔬菜中的农药对胆碱酯酶 的活性起抑制作用,抑制程度的大小 与农药的残留毒性成线性相关。 •GB/T 5009.199-2003规定:样品农药 残留对乙酰胆碱酯酶抑制率≥50%时为 样品农药残毒超标;抑制率≤50%时为 农药残毒不超标。 2 试剂配制 缓冲液 酶试剂 显色剂 底物 加入500ml纯净 直接使用。 加25ml缓冲液 加12.5ml纯净 水摇匀溶解后 在0-5℃下保存 溶解,0-5℃下 水溶解,0-5℃ 常温保存 保存 保存 1、配制以试剂瓶上的标签为准;2、至少提前半小时从冰箱取出 3 样品处理 A 颜色不深的样品 (如白菜、卷心菜 ) 取2克样品加10ml缓冲液,浸提5分钟,取上清液2.5mL到比色皿。 B 色素较多的果蔬 (如西红柿、草莓 ) 整粒提取,按比例加缓冲液,浸提5分钟,取上清液2.5mL到比色皿。 如样品的重量为N g,缓冲液的用量为 (N/2) *10mL C 带刺激性气味的样品 (如葱、韭菜、辣椒 ) 取2克样品加10ml缓冲液,浸提5分钟,取清液5mL,沸水浴3分钟,冷却后 取2.5mL到比色皿 4 农药残留检测 比色皿中加0.1ml酶液,加2.5ml缓冲液,加0.1ml显 空白 色液,10分钟后加0.1ml底物。马上放入A1通道中, 对照 点 “对照”,3分钟后仪器显示 “已对照” 在已加2.5ml样品处理液的比色皿中,加0.1ml酶液, 样品 加0.1ml显色液,10分钟后加0.1ml底物。马上放入 检测 通道,点 “检测”,3分钟后显示结果 5 检测结果判断 GB/T 5009.199-2003规定: •样品农药残留对乙酰胆碱酯酶抑制率≥50%时为样品农药残毒超标 •样品农药残留对乙酰胆碱酯酶抑制率≤50%时为农药残毒不超标。 •当被测样品的抑制率在50%以上时,表明被测样品的农药残留可能超过安全的 界定标准,建议用气相色谱方法及其它分析方法进一步确认; 6
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