猪病诊断技术PPT.pptVIP

一、猪病综合诊断;1、猪病流行病学调查的步骤和内容;（2）调查内容 ① 疾病流行情况：最初发病时间、地点，随后蔓延的情况，目前的疫情分布。疫区内猪的饲养数量和分布情况，发病猪的数量、年龄、性别、品种，疫病传播速度和持续时间等。本次发病后是否进行过诊断，采取过哪些措施，效果如何。防疫情况如何，接种过哪些疫苗，疫苗来源、免疫方法和剂量、接种次数等。是否做过免疫监测，群体抗体水平如何。发病前有无饲养管理、饲料、用药、气候等变化或其他应激因素存在。查明感染率、发病率、病死率和死亡率。;特别关注以下指标的调查;患病率：特定时间所调查猪群中某病新旧病例数，而不管这些病例的发病时间,反映了某病的致病力。　　 病死率：是指在一定的时间内，患某病的病猪中因该病而死亡的比值。病死率反映了某种疾病的死亡概率，表示疾病的严重程度，也反映治疗水平。多用于急性病，较少用于慢性病。 死亡率：是某猪群在一定时间内因某病死亡猪数与该猪群同期平均数之比。 反映猪群总的死亡水平，是衡量猪群因病死亡危险（机会）大小的指标。也反映一个地区不同时期猪群的健康状况、卫生保健水平。 ;②疫情来源情况：本地过去曾否发生过类似的疫病，在何时何地发生，流行情况如何，是否经过确诊，有无历史资料可查，何时采取过何种防治措施，效果如何；如本地未发生过，附近地区曾否发生过；这次发病前，周边地区有无疫情；曾否由其他地方引进过活猪、猪产品或饲料，输出地有无类似的疫病存在；是否有外来人员进入本场或本地区进行参观、访问或购销等活动。;2、临诊症状观察;3、尸体剖检（后期专门讲解）;4、病理组织学诊断;5、病原（因）学诊断;（2）现代分子生物学（基因诊断）方法 基因诊断是采用分子生物学方法在DNA水平或RNA水平对某一基因进行分析，从而对特定的疾病进行诊断。基因诊断可以利用特定的DNA探针与目的基因形成分子杂交的机理，也可以利用已知DNA序列设计引物对目的基因进行PCR扩增，从DNA水平和mRNA的基因转录水平上检测出正在生长的病原体或潜伏病原体，确定现行感染还是以往感染；省却有些病原体原来需体外培养后方可诊断的步骤。从而对传染性疾病作出诊断。 ;感染性疾病外源性基因的检测：主要包括感染性病毒、细菌、支原体、寄生虫等在猪体内存在的生物外源性DNA或RNA。 这类检测一般根据已知的外源DNA序列采用PCR或RT-PCR的方法就可以进行快速、简便而准确的诊断；因而，传染性疾病的基因诊断应用性极强，目前已经在临床上普遍开展。 ;①聚合酶链式反应（PCR）技术。通过检测特定基因进而检测病原体，PCR现已成为基因诊断的主要方法，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点；而反转录PCR(RT-PCR)则用于检测RNA病原体。; ②分子探针技术：DNA探针杂交技术是以已知DNA片段作为探针与待测样品DNA或其片段进行核酸分子杂交，从而确定两者的同源程度。另外，根据重组技术所制造的基因芯片，即将特定序列DNA片段（基因探针）固定在硅片上，用于基因测序，寻找病原的目的基因或对基因的序列进行分子水平上的分析 。;病名;6.血清学诊断;①全血平板凝集试验:本试验在实践中主要用于细菌性疾病的抗体检测和抗原(经分离培养后)的鉴定。如猪丹毒抗原(丹毒杆菌的纯培养液)测定被检猪血清中的抗体。　　 ②试管凝集试验:试管凝集试验是一种定量法,用于测定被检血清或其他体液中有否某种抗体及其效价,可作临床的辅助诊断,或用于流行病学监测。在猪场中,本法常用于猪布氏杆菌病的诊断。 ;③间接红细胞凝集试验：本法简称间接血凝试验。其原理是：将抗原(或抗体)吸附在比其体积大千万倍的红细胞表面,只需少量的抗体(或抗原)就可使这种致敏的红细胞通过抗原和抗体的结合而出现肉眼清晰可见的凝集现象。这种试验能大大提高反应的敏感性,如猪瘟检测. 　 用抗体致敏红细胞检测相应的抗原,称为反向间接血凝试验,反之,称为正向间接血凝试验。在猪病的诊断中,常采用本法对猪口蹄疫、水疱病、猪瘟、传染性胸膜肺炎等疾病抗原的鉴定,或抗体的检测。　　;④乳胶凝集试验：本法在猪病中主要用于伪狂犬病和萎缩性鼻炎的诊断,是用其病毒致敏乳胶抗原来检测被检猪的血清、全血或乳汁中的抗体,具有简便、快速、特异、 敏感的优点。; （2）沉淀试验 沉淀试验的原理是：利用可溶性抗原如细菌的培养滤液、病毒的可溶性抗原和血清等,与相应的抗体结合,在电解质存在时,可形成肉眼可见的白色沉淀物。参加沉淀反应的抗原,称为沉淀原，抗体叫做沉淀素。沉淀试验的具体方法有多种,如环状沉淀试验、琼脂扩散试验和免疫电泳等。在猪病的诊断中,目前最常用的是琼脂扩散试验。本法可用已知抗原测定未知抗体,反之亦然。在猪病的实验室诊断中，常用于猪伪狂犬病的抗体检测,也可用