基于硼酸络合作用的生物分子选择性识别、富集、分离和浓缩新技术新方法.pdfVIP

第十七届全国色谱学术报告舍及仪器展览台会议论文集 O．F012 基于硼酸络合作用的生物分子选择性识别、富集、分离和浓缩新 技术新方法+ 刘震”，任连兵，何坚刚，刘晶，窦鹏，陈洪渊 南京大学化学化L学院．生命分析化学教育部重点实验室，南京210093 关键词：硎亲和色谱，整体柱，l卸相微萃取，磁性纳米蕈取，在线样品浓缩，顺式邻二羟基化合物 硼酸及取代硼酸与顺式匀j二羟基化台物的结台作用在160年前就被人Ⅱj所认识。硼酸厦取代硼 酸能与顺式邻_二羟基化合物在碱性条件下形成五元环或六元环的酯．而产物酯在酸性条什F解离。 该反应为受口H调控的可逆弛价反应。硼酸络合作用自上世纪60年代就被利用来对赭等进行化学传 感检测。以取代硼酸为亲垧l配基，上1t纪80年代早划开始发展出了硼亲和色谱(Boronateaffinity 糖蛋白，糖、儿茶酚胺和核苷等都禽 chromatography)技术。山丁很多重要的生物分子，如RNA， 有顺式邻二羟基，删采年¨色谱是一个重要的分析工具。尽管硼化学在分析化学已经有了这些应川， 但是，硼酸络台作埘在生物分子识刖、甯集车¨分离等方面的应用还有广阔的前景。本文介缁作者实 验宣近蝤年在删酸络台”zJIJ麻川]‘生物分子的选择性识别、富集、分离和浓缩方面的进展。 首先，通过自由基聚合虬一步法“制备了硼酸功能化的毛细管整体柱，系统考察了其选择性和 色谱保留机理，井将制得的褴体杜麻川丁糖蚩白雨『糖肽的微枉液相色谱富集和分离。为了使硼酸络 合作川在生理pHF发生，我们提出，利用高分子聚台物功能单体间的协同作用，制并山了可以利 用于生理pH条什的删酸功能化的毛细管整体{j}!。其敬，利川电化学聚合法制蔷出了硼采和阎相微 萃取探针，建立r与高效液相色谱联用的方法．井成功应J{{于啤酒中核黄素的分析。第二，舍成了 三种硼亲自哪能化磁性纳米牡子，利用其作为磁性纳苹取的探针，建立了与毛细管屯泳联用的方法， 并成功麻用于人尿中核黄索的分析。最后．提山了硎络合作用辅助的场放大样品堆积原理，川毛细 管电淋对顺式邻二羟基化台物进行在线样黼浓缩。浓缩效率比没有硼络台作用辅助时明显提高．浓 缩倍数可高选2500倍。该方法利H{实际样品乌龙茶得到了验证。 代表性结果 “通讯作氰刘震．ElTla-l：出业蝗血幽 第十七届全国色谱学术报告台履仪器展览会会议论文集 ‘ 譬 留l硼酸功能化的毛自l管整件柱(A)、同相微革取探针(B)和磁性纳米粒于(c)的}b镜圈 圈2硼亲和毛细管整件柱披相也啭对格蛋白辣根过氧化氧瞎(HRP(^)胜萁胰蛋白酶酶解产物(B)的富集 |●if 图3核黄素标扦直接进样(A)和赫被巾棱黄繁经硼亲和同捆徽萃取处理后得到的样日(B)的渡相色谱爵圈 !；含嚣i翘；：!!：：勰嚣嚣?“屎样舯“地赞素腓硼崇“性纳米萃取处“””。 第十七届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集 图5儿茶素及鸟龙茶的浓缩及分离。A：三种儿茶素标准品，常规压力进样；B：将A中被分析物用25mM H3803+0．24mM 压力进样；D：将乌龙茶用25mMH3803+0．24mMNazS205(pH=9．50)稀释50倍，场放大样品进样。 O．F013 一单体型分子印迹整体固定相分离手性药物萘普生1 武曦 黄艳萍 李蕊刘照胜” 天津医科大学药学院，天津300070 关键词：一单体、毛细管电色谱、手性分离、萘普生 分子印迹技术是以目标分子为模板分子，将具有结构上互补的功能化聚合物单体通过共价或非 共价键与模板分子结合，并加入交联剂进行聚合反应，反应完成后将模板分子洗脱出来，形成的一 种具有I古|定空穴大小和形状及有确定排列功能团的交联高聚物，即分子印迹聚合物，目前已成为合 成具有预定选择性的矧定相的新兴技术。 以非共价印