土壤中分离的棘阿米巴的18s rDNA分型鉴定及大蒜素对棘阿米巴的体外杀伤作用.pdfVIP

延边大学病原生物学专业硕士学位论 土壤中分离的棘阿米巴的18srDNA分型鉴定 及大蒜素对棘阿米巴的体外杀伤作用 摘要 rDNA基因型：并观察大蒜素对棘阿米巴的体外杀伤作用。【方法】延边地区土壤 中分离的Acanthomooba sp．CJY／S1株PYG培养，常规氯仿一酚提取基因组DNA， rDNA序列。利用Genebank 应用棘阿米巴属特异性引物，PCR方法扩增并测18S 行比较并构建进化树。将致病性棘阿米巴用不同浓度的大蒜素处理，对照组加等 量的PYG，30℃培养。分别于3h、24h在显微镜下观察细胞形态变化，作生长曲 线观察增殖速率的变化，并透射电镜下观察其超微结构损伤情况。【结果】从延 边地区土壤中分离的棘阿米巴18S rDNA序列全基因长为2255bp，其基因型为T4 型，与基因库中Acanthamoeba 分别于处理24h、3h后观察到大量细胞分裂碎片：细胞生长曲线显示，与正常对 结构改变表明，大蒜素作用浓度为lOOug／ml时，对棘阿米巴的结构产生轻度破坏， 当大蒜素作用浓度为1000ug／ml时，对棘阿米巴的结构产生严重破坏，导致棘阿 米巴完全坏死。【结论】Acanthamoeba castellanii；在体外大蒜素对棘阿米巴生长有明显抑制作用。 【关键词】棘阿米巴：18SrDNA；基因型；分类；大蒜素 延边大学病原生物学专业硕卜学位论 characteriza“onofAcantitamoebastrain Molecular isolatedfromsoiland ontheeffectofAllitridium study vitro Acanthamoebain against AbStract the18SrDNA ofAcanthamoebastrainsisolated [Objective]Toanalyse genotype from detecttheeffectofAllitridiumOil JilinYanbian soil(CJY／S1)and wasisolated strainofAcanthamoebafromsoil Acanthamoeba卿．【Methods】A DNA strain andculturedinPYG．Full ofthe ofAcanthamoebawas genomesequences PCR，thenthePCR were 18SrDNA amplifiedusing productssequenced．The was ClustalXsoftwareand withother sequenceanalyzedby compared strains．By Acanthamoebacastellanii influenceofAllitridiumonthe Neff，the morphological