20102617王淼姜黄素磷脂复合物的制备、药效学评价及代谢动力学研究PPT.ppt

姜黄素磷脂复合物的制备、药效评价及在大鼠体内药代动力学研究 Kuntal Maiti， Kakali Mukherjee ， Arunava Gantait， Bishnu Pada Saha， Pulok K. Mukherjee Jadavpur大学 天然产物化学学院制药工程系 王淼 Shenyang Argiculture university （译） 1前言 2材料和方法 3实验结果 4讨论 Thank You！ December 22th 2010 1前言 1姜黄素简介 2磷脂复合物的研究 2材料和方法 2.1 材料 2.2 姜黄素磷脂复合物的制备 2.3 复合物中姜黄素含量测定 2.4 复合物的显微特征 2.5 复合物的差示扫描热特征 2.6 高效薄层色谱法研究 2.7 溶解性能研究 2.8 抗氧化性活性测定 2.9 大鼠血清姜黄素含量的测定 2.10 药动学参数研究 2.11 统计学分析 2.9 大鼠血清姜黄素含量的测定 2.9.1 血清中姜黄素提取和样品的预处理 2.9.2 标准溶液的制备 2.9.3 有效提取含量的测定 3实验结果 3.1 复合物中姜黄素含量 3.2 复合物的显微观察结果 3.3 差示扫描热量吸收图谱 3.4 高效薄层色谱的研究 3.5 抗氧化酶的活性 3.6 姜黄素在血清的浓度变化 3.7 药动学参数 姜黄素（1,7-双(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1,6-庚二烯-3,5-二酮） 着色剂和食品中的香料，具有抗氧化性、抗炎、抗癌、降低血液中胆固醇含量、抗感染、促进伤口愈合、镇静、抗凝血、抗肿瘤以及保肝作用。 姜黄素口服难吸收，在水中极难溶解，而且代谢途径复杂多样，因而也很难建立药代动力学模型。在啮齿类，姜黄素经过共价结合或还原等代谢，口服给药的典型特征就是生物利用度极低。 磷脂可以增强一些口服难吸收的药物的疗效。水飞蓟宾就是其中一种口服生物利用度极低的药物分子。水飞蓟宾磷脂复合物，不仅增加了口服生物利用度，还提高了药物疗效。实验观察到水飞蓟宾磷脂复合物比单纯水飞蓟宾具有更好的护肝作用和抗氧化作用。槲皮素磷脂复合物对四氯化碳造成的大鼠肝脏急性损伤的治疗效果优于槲皮素。 2.1材料 磷脂，氢化大豆磷脂酰胆碱（HSPC），购买自德国路德维希港脂质化工厂；姜黄素购买自美国Sigma Chemical；EDTA，丙二酰硫脲，三氯乙酸，羧甲基纤维素钠，十二烷基硫酸钠，正己烷和其他试剂购买自印度Mumbai Loba Chemie；谷胱甘肽，谷胱甘肽还原酶，牛血清白蛋白，三羟基氨基甲烷缓冲液，四硝唑基蓝，5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)，吩嗪N-甲硫酸盐，正辛醇购买自印度Mumbai SRL Chemicals 。 2.2姜黄素磷脂复合物的制备 姜黄素和HSPC按摩尔比为1：1称取，加到100毫升的圆底烧瓶中，加入20ml二氯甲烷，在不超过60℃的条件下搅拌2小时。将反应后的溶液蒸干，加入10毫升正己烷继续搅拌至姜黄素磷脂复合物析出，过滤，取沉淀减压真空干燥，除去残留的溶剂。反应得到的姜黄素磷脂复合物（产率88%）放置于充氮气的棕色瓶中，室温保存。 2.3复合物中姜黄素含量测定 姜黄素的含量测定选用Jayaprakasha等人研究的方法。称取约5毫克的磷脂复合物加入1毫升甲醇溶解，然后用甲醇定容至10毫升。测定的时每一次进样20微升，采用Waters-μ-Bondapack C18色谱柱（300mm×4.6mm），流动相甲醇：2%醋酸：乙腈（V/V/V）为5：30：65 。洗脱液流速室温控制在1.0毫升/分钟，检测波长为425nm。 2.4 复合物的显微特征 采用Leica （ type DC 300F）显微镜 ，CH-9435 Heerbrugg 等来检测复合物的显微特征。复合物用蒸馏水分散后，取样放在载玻片上，盖上盖玻片进行观察。样品的放大倍数为400倍。 2.5 复合物的差示扫描热特征 将样品装在密封的铝制薄管中，在充满氮气的反应室内，温度从0℃以每分钟10℃的速度上升至300℃。姜黄素、磷脂、姜黄素磷脂复合物以及姜黄素和磷脂的物理混合物的能量吸收跳跃以及差示扫描图谱采用Mettler DSC 30S 系统进行分析比较。 2.6 高效薄层色谱法研究 姜黄素磷脂复合物和姜黄素均用甲醇制成溶液，然后将甲醇溶液点样在预先铺好硅胶60 F254 的薄层色谱板上，展开剂为二氯甲烷：甲醇（V/V）按照99：1的比例配制，薄层板在层析缸中的倾斜角度为70°。层析以