实验二 灵芝孢子的物理破壁与超声波破壁.docVIP

实验二 灵芝孢子的物理 破壁与超声波破壁 一、实验内容： 采用冷冻与超声波方法进行灵芝孢子的破壁，观察二种方法破壁技术优劣。 二、实验目的： ⑴、灵芝孢子有一层极难被人体胃酸消化的几丁质构成的外壁，不破壁的孢子粉人体无法消化吸收，只有打开这层外壁，由外壁紧裹的有效成分才能最大程度地被人体利用吸收。 ⑵、破壁后人体对灵芝孢子粉的吸收率可提高45倍之多。壁孢子粉比不破壁孢子粉具有更强的体外毒杀癌细胞的活性。 ⑶、本实验的目的就是利用冷冻法和超声波法进行灵芝孢子粉的实验实习。 三、实验材料： 1、灵芝子实体，每组一个； 2、毛刷，每组一个 3、500毫升烧杯2只 4、75％酒精 5、无菌水 6、恒温水浴锅 7、超声波炉 8、显微镜 四、试验方法： ㈠、物理机械破壁方法： 1、刷灵芝孢子和镜捡：首先把灵芝子实体表面的灵芝孢子粉用小刷子刷到玻璃烧杯里。显微镜捡查观察未破壁灵芝孢子形态特点。 2、预处理：又称温差破壁，它具有增强破壁效果。具体操作为： ⑴、取500毫升烧杯2只，编号后于每只烧杯中放入干燥孢子粉若干克。 ⑵、每只烧杯中分别加入75％酒精，浸没孢子粉并用玻棒搅拌2分钟，盖好烧杯杀菌2小时。 ⑶、各烧杯分别加入180毫升无菌水搅拌，放入－17℃冰箱或冰柜中冷冻48小时。 ⑷、取出置50℃左右恒温水浴中热溶，不能搅拌，再置40℃水浴中热溶2～3小时。取少许制涂片，其余供以下各种破壁用。 ㈡、超声波破壁 2、超声－冻融破壁法 ⑴、将超声波功率调至250瓦，频率22千赫，接通电源。 ⑵、2号烧杯预处理后的孢子液注入锥形瓶内，置超声波机中处理30～40分钟，取少许制涂片。 ⑶、高倍显微镜下观察测算破壁率。 超声波具空化效应、高频振动和超大混合作用，在一定的功率和频率下，悬浊液中的孢子发生剧烈振荡，从而使孢子壁破裂，结合冻融处理，其破壁效果更好。超声波破壁法需30分钟左右，营养成分破坏较少，且能杀灭孢子中杂菌，破壁率高。 五、实验报告 1、详细描述灵芝孢子物理和超声波破壁的过程 2、绘出未破壁和破壁的灵芝孢子形态图（每种至少绘出5个灵芝孢子图）。 附录：未破壁和破壁的灵芝孢子形态图 电镜下未破壁和破壁的灵芝孢子形态图