体内药物分析方法的设计与评价.docVIP

体内药物分析方法的设计与评价? 一、分析方法的设定依据：（一）重视并做好文献总结、整理工作；（二）充分了解待测药物的特性及体内存在状况；（三）明确测定的目的要求；（四）实验室条件。 二、方法建立的一般实验步骤： （一）以纯品进行测定：以一定量纯品按拟定方法进行测定。求得浓度与测定响应值之间（如吸收度、色谱峰高或面积等）的关系，浓度线性范围，最适测定浓度，检测灵敏度，测定的最适条件（pH、温度、反应时间）等等。 （二）以经过纯化处理过的空白样品进行测定； （三）空白样品添加标准后的测定：血样等样品中添加一定量标准品后进行测定，求得样品回收率数据，检验生物样品对测定有无干扰等。 （四）体内实际样品测定：有时用体外建立的方法去测定体内取得的实样时，会得出错误的结论。故要强调对药物体内过程有一定程度的了解。有时也采用专属性强、已证明适用于体内实样测定的步骤和方法作为对照测定，并以此来检验所建立的方法的实际可行性。 三、方法的评价： （一）准确度(Accuracy)：测定结果与真值的符合程度。常用回收率(Recovery)数值间接反映测定的准确程度；也可通过与其他已建立的方法进行比较的办法（参比方法）来加以反映。回收率100%当然好，但很难达到。重要的是每次测定要保持稳定。 （二）精密度(Precision)：测定结果与平均值的偏离程度。测定间偏差越小，对测定的要求也越高（花费大）；浓度与RSD值间存在反比关系，RSD在10%以内的方法可认为是可接受的。 （三）灵敏度(Sensitivity)：“一种方法可以检测出有关化合物的最小量”。常用最低检测限(Limit?of?detection,LOD)或最低检测量(Limit?of?quantification;LOQ)来表示。LOD范围在ng(10-9g)～10-18g。 （四）专属性或选择性(Specificity?or?Selectivity)：是指测定的信号（响应）是属于被测药物所特有的。若有干扰就需改进测定方法或改用具有分离能力（如色谱法的专属性较吸收光度法为高）的方法或专属性较强的方法进行。 （五）不同方法测得结果的相关程度(Degree?of?correlation)的比较：用一有相当专属性和可靠性的方法与新建方法同量测定，以相关系数γ(Correlation?coefficient)表示相关程度。γ一般要求在0。95以上。  此外，还应从方法的可靠性、每个样品测定耗时多少、操作的难易及技术要求及仪器、设备要求、费用多少等等方面加以考虑。? 分析质量管理（A.Q.C.—Analytical?Quality?Control）及质量保证（Quality?Assurance）已成为体内药物分析的一项重要的计划内容。对仪器、试剂、方法、操作技术等进行系统的分析质量管理，可监督分析质量所处的状况，引起警觉并推动人们去改善分析工作的各个环节。即，分析质量管理的近期目的是通过对测定结果的分析，对该次测定结果作出评价，并按照设定指标决定结果的取舍，以保证测定结果的质量。远期目的是通过质量管理可以发现和分析造成“分析质量差”的原因，以便改进实验设计，提高测定质量。 A.Q.C.可分为内部质量管理 (Internal?QC)和外部质量管理(External?QC)两种计划。内部QC是指实验室内部的质量检验，它也是保证实验室间结果（外部QC）有可比性的基础。在各实验室做好内部QC的基础上，由中心试验室或协调实验室每年分发一、二次标准对照样品，并分类进行分析，然后综合各实验室提供的分析结果并进行统计处理，把结果及时送给各个实验室，从而发现一些系统误差并评价所采用的分析方法以及分析数据的质量。?? 应当指出：A.Q.C.工作本身只能是检验分析结果的质量，而不能直接改进分析结果的质量。