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β―榄香烯纳米聚合物胶束包封率、载药量及释药性测定 　　摘要：目的 建立β-榄香烯纳米聚合物胶束包封率和载药量的RP-HPLC测定方法，并对其释药性进行考察。方法 以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000（DSPE-PEG2000）为载体材料制备载药胶束，采用石油醚萃取法测定包封率和载药量，采用透析法对其释药性进行研究。结果 所制备的β-榄香烯纳米聚合物胶束平均包封率为89.47%，平均载药量为8.33%，体外释药缓慢。结论 包封率和载药量的测定简便、准确，所制得的胶束具有缓释作用。 　　关键词：β-榄香烯纳米聚合物胶束；包封率；载药量；释药性 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2017.02.023 　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2017）02-0091-03 　　榄香烯是临床常用的中药广谱抗肿瘤药物，该药及其脂质体注射液和口服乳制剂通过抗增殖和诱导凋亡作用，在体外及临床用于脑胶质瘤治疗方面取得了较好治疗效果，但也存在一定不良反应[1-3]。β-榄香烯是由榄香烯经精馏后去除γ、δ-榄香烯异构体，得到的抗癌单体有效成分[4]。为增加β-榄香烯对血脑屏障的透过性及其载药制剂在肿瘤组织的通透和滞留增强效应，本课题组以二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇（DSPE-PEG2000）为载体材料，将其制成抗脑胶质瘤的新型脑靶向制剂，本研究对其包封率、载药量进行测定，并考察其体外释药性，为进一步控制本品质量、优化制备工艺及其应用提供依据。 　　1 仪器与试药 　　Agilent 1100高效液相色谱仪（美国安捷伦公 　　司），CENCO型涡旋仪（荷兰Breda公司），RCZ-6B3型药物溶出度仪（改装为释放溶出仪，上海黄海药检仪器有限公司），85-1型集热式恒温加热磁力搅拌器（江苏省金坛市友联仪器研究所），透析袋（截留分子量8000～15 000，上海华蓝生物科技有限公司），旋转蒸发器RE-52A（上海亚荣生化仪器厂）。 　　β-榄香烯原料药（含量98%，自制），β-榄香烯对照品（中国食品药品检定研究院，批号100268- 200401，供含量测定用），DSPE-PEG2000（上海艾韦特医药科技有限公司，批，甲醇为色谱纯，其余均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 β-榄香烯纳米聚合物胶束及空白胶束的制备 　　采用薄膜水化法制备。精密称取处方量的DSPE-PEG2000载体材料100 mg、β-榄香烯原料药10 mg，置于茄形瓶中，加10 mL甲醇溶解，摇匀，于35 ℃旋转蒸发真空干燥除去甲醇，在茄形瓶底部及内壁形成一层均匀的脂膜，加入pH 7.4磷酸盐缓冲液5 mL，在40 ℃水浴中水化30 min，冷却至室温，经0.2 ?m聚碳酸酯膜过滤，即得透明的β-榄香烯纳米聚合物胶束（β-ELE-DSPE-PEG2000-PMs）[5-6]。同法制备不加β-榄香烯原料药的空白胶束。 　　2.2 包封率和载药量的测定 　　2.2.1 色谱条件 色谱柱为DiamonsilTM C18（5 μm， 200 mm×4.6 mm），流动相为甲醇-水（95∶5），流速1.0 mL/min，柱温35 ℃，检测波长210 nm。 　　2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取β-榄香烯对照品8.30 mg置于10 mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。 　　2.2.3 供试品溶液制备及包封率、载药量测定 精密量取β-ELE-DSPE-PEG2000-PMs 1 mL置25 mL量瓶中，加入适量甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，即得载药胶束供试品溶液，测定胶束中总的药物量（W1）。同法制成空白?z束对照溶液。另精密量取β-ELE-DSPE-PEG2000-PMs 1 mL于5 mL离心管中，加入石油醚（30～60 ℃）3 mL，摇匀，涡旋3 min，静置，待分层后，弃去石油醚层，同法重复萃取1次，除去未包封的游离β-榄香烯。将下层胶束加入适量甲醇溶解，转移至25 mL量瓶中并稀释至刻度，摇匀，过0.45 μm微孔滤膜，测定石油醚萃取后包封的β-榄香烯药物量（W2），计算包封率（EE），EE（%）=W2/W1×100%[5-6]。载药量（DL）即胶束中单位质量的DSPE-PEG2000可以包封的药物，DL（%）=W2/W×100%，W为DSPE-PEG2000加入量。 　　2.2.4 空白干扰试验 精密吸取上述对照品溶液、载药胶束供试品溶液、空白胶束溶液各10 μL，按上述色谱条件测定，结果空白胶束对本品含量测定无干扰。色图谱见图1。 　　2.2.5 线性关系考察 分别精密量取“2.2.2”项下对照品溶液