基因工程考试完整版试题.docVIP

填空 4．基因工程的两个基本特点是： (1) ，(2) 。4． (1)分子水平上的操作；(2)细胞水平上的表达 5．基因克隆中三个基本要点是： ； 和 。5． 克隆基因的类型；受体的选择；载体的选择 2. 由于不同构型的 DNA 插入EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同，SC DNA 的泳动速度 ，OC DNA 泳动速度 ，L DNA 居中，通过凝胶电泳和EB 染色的方法可将不同构型的DNA 分别开来。2． 最快；最慢 4. 就 克 隆 一 个基因(DNA 片段) 来说， 最简单的质粒载体也必需包括三个部分： 、 、 。另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。4． 复制区： 含有复制起点；选择标记： 主要是抗性基因；克隆位点：便于外源DNA 的插入 6. 质粒拷贝数是指细胞中质粒的份数同染色体的比值，即质粒／染色体 。 13. YAC 的最大容载能力是 1000kb ，BAC 载体的最大容载能力是 300kb 。 3．λ噬菌体的基因组DNA 为 kb，有 多个基因。在体内，它有两种复制方式，扩增时(早期复制)按 复制，成熟包装(晚期复制)则是按 复制。它有一个复制起点，进行 向复制。λ噬菌体的DNA 既可以以线性存在又可以环状形式存在，并且能够自然成环。其原因主要是在λ噬菌体线性DNA 分子的两端各有一个 个碱基组成的天然黏性末端。这种黏性末端可以自然成环。成环后的黏性末端部位就叫做 位点。 48．5；60；凯恩斯模型； 滚环； 双；12； COS 4．根据噬菌体的包装能力，将野生型λ噬菌体的基因组DNA 改造成插入型载体，该载体的最小分子大小约为 kb，插入的外源片段最大不超过 kb。 36； 14 5．野生型的M13 不适合用作基因工程载体，主要原因是 和 。 没有合适的限制性内切核酸酶识别位点；选择标记 6．黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体，它的复制子来自 、COS 位点序列来自 ，最大的克隆片段达到 kb。质粒；丸噬菌体； 45 7．有两类改造型的λ噬菌体载体，即插入型和取代型。从酶切点看，插入型为 个，取代型为 个。1； 2 8．野生型的丸噬菌体DNA 不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。 (1)分子量大，(2)酶的多切点，(3)无选择标记 11 ．M13 单链噬菌体基因2 和基因4 之间的IG 区有三个最重要的功能，即(1) (2) (3) 。(1)正链复制起点； (2)负链复制起点； (3)包装信号 12．野生型的M13 有10 个基因，分为三个功能集团，其中与复制有关的两个基因是： 和 。基因Ⅱ；基因Ⅴ 13．以λ噬菌体载体和黏粒载体构建文库时，起始DNA 的长度是不同的，前者为 kb，后者为 kb。100kb；200kb 14．λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源DNA 片段后，总的长度应在噬菌体基因 组的 的范围内。75％一105％ 5．Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小．一般在20~40kDa，通常由 亚基所组成。 它们的作用底物为双链DNA，极少数Ⅱ类酶也可作用于单链DNA，或DNA／RNA 杂合双 链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求，而且对更远的碱基也 有要求，因此，Ⅱ类酶既具有 专一性，也具有 专一性，一般在识别序 列内切割。切割的方式有 ，产生 末端的DNA 片段或 的DNA 片段。作用时需要 作辅助因子，但不需要 和 。2~4 个相同的；切割位点；识别位点的；平切和交错切；平；具有突出黏睦末端；Mg2+；ATP；SAM 6．完全的回文序列具有两个基本的特点，就是：(1) (2) 。(1)能够在中间划一个对称轴，两侧的序列两两对称互补配对；(2)两条互补链的5’ 3’的序列组成相同，即将一条链旋转180°，则两条链重叠 7．Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别 个碱基，也有识别多序列的限制性内切核酸