同源重组快速构建甘蓝SCR酵母双杂交诱饵载体及其自激活作用的检测.PDFVIP

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同源重组快速构建甘蓝SCR酵母双杂交诱饵载体及其自激活作用的检测

( ) 第 卷第 期 西 南 大 学 学报 自然科学版 年 月 34 8 2012 8 ( ) Vol.34 No.8 JournalofSouthwestUniversit NaturalScienceEdition Au. 2012 y g 文章编号: ( ) 1673 9868201208 0079 07 同源重组快速构建甘蓝SCR酵母双杂交 诱饵载体及其自激活作用的检测① , 12 1 1 1 1 罗 兵 , 朱利泉 , 薛丽琰 , 张贺翠 , 彭一波 , 1 1 3 3 3 杨 红 , 杨 昆 , 高启国 , 李成琼 , 王小佳 , ; , ; 1.西南大学 植物生理生物化学实验室 重庆 400716 2.常熟理工学院 生物与食品工程学院 江苏 常熟 215500 , 3.西南大学 重庆市蔬菜学重点实验室 重庆 400716 : , , 摘要 采用巢式PCR获得甘蓝SCR的成熟肽编码区 利用同源重组技术首次将其克隆到pGBKT7载体中 构建酵 , : , 母双杂交系统的诱饵载体 pGBKT7-SCR 结果表明 通过巢式PCR获得了正确的甘蓝SCR成熟肽编码区 并成功 , / , / 构建到 诱饵载体中 且转化有诱饵载体的 在 营养缺陷平板上生长良好 而在 GBKT7 Y2HGold SD-Tr SD- p p / / / , ; 和 营养缺陷平板上皆不能生长 说明对报告基因无自激活作用 且毒性实验也表 HisTr SD-Tr X-aGalAbA - p p - 明,SCR蛋白对酵母没有毒害作用. : ; ; ; ; ; 关 键 词 甘蓝 蛋白 同源重组 酵母双杂交 诱饵载体 自激活 SCR 中图分类号:Q78 文献标志码:A

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