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分子标记辅助选择辣椒抗疫病新种质研究
北方 园艺2013(Jo):107~J]O ·生物技术 · 分子标记辅助选择辣椒抗疫病新种质研究 马 寿 宾,孙 艳,王 琛,刘 倩 倩,李 敏,刘 维 信 (青岛农业大学 园艺学院,山东 青岛 266109) 摘 要 :以野生辣椒 1‘2—16’和甜椒 三‘道筋’、1‘2—1’、‘12-19’为试材 ,选用与辣椒疫病抗性相 关的4对引物,对 4份辣椒材料的疫病抗性进行了快速鉴定。结果表明:4份辣椒材料中,1‘2—16’ 中能够扩增出抗病特异性条带,推断其为抗病材料;其它3份材料均未扩增出抗病特异性条带, 表明其为感病材料 ;供试的4对引物中仅有 1对引物的稳定性和重复性较高。 关键词:辣椒;疫病 ;分子标记;育种 中图分类号:S641.3 文献标识码:A 文章编号 :1001--0009(2013)1O—O107一O4 辣椒疫病是一种由辣椒疫霉菌(Phytophoracapsici) 病标记辅助育种奠定 了基础 。国内外学者通过构建辣 引起的土传病害,1918年在美国墨西哥洲首先被发现。 椒的遗传图谱和 QTL分析研究,已开发出了与辣椒疫 在国内,在江苏省首先发现辣椒疫病[1],戚佩坤等 报道 病抗性基因紧密连锁的一系列分子标记,并且应用于分 该病 曾在长春大范围爆发,2O世纪 70~80年代在我国 子辅助育种{。。]。 新疆,辣椒疫病成为毁灭性病害。近年来 ,国内外研究 目前 ,辣椒特别是甜椒类 的抗疫病材料较为缺 者对辣椒疫病发病机理及抗病机制进行 了广泛的研究。 乏[1“],有必要利用分子标记手段对材料进行广泛的抗 大量试验结果证明,不同辣椒材料的疫病抗性遗传模式 病性鉴定。因此,该研究采用已经报道的4对与辣椒疫 呈现多样性,Polach等[3]和Smith等_4]认为辣椒的疫病 病抗性相关的引物,验证其稳定性和适用性,旨在为进 抗性是由寡基因控制的,Pochard等L5的研究指出,辣椒 一 步利用分子标记鉴定抗疫病材料,加快辣椒抗疫病育 P‘M217’对疫病的抗性是由多基因控制,而 Kim[]的研 种进程提供依据。 究表明,部分辣椒材料的抗病性是由单基因控制。辣椒 1 材料与方法 疫病抗性遗传规律的多样化可能是由于不同材料携带 1.1 试验材料 的抗病基因所处的位点不同,或者不同辣椒材料的抗病 供试的 1份野生辣椒材料 1‘2—16’和 3份甜椒材料 遗传方式不同。此外,辣椒疫霉菌株群体内不同交配型 三‘道筋’、1‘2—1’、1‘2—19’均 由青岛农业大学园艺学院 的同宗或异宗配合可能会导致菌体的遗传变异 ,也可能 提供 。 造成同种辣椒抗性基因位点的变化[7]。 1.2 试验方法 目前国内外对于甜椒 的疫病分子标记研究报道较 1.2.1 DNA的提取及检测 采用 SDS法提取辣椒总 少,张晓芬等E83以高抗疫病的甜椒育种材料 N‘1345’与 DNAl1略有改进,用 1.5 琼脂糖凝胶 电泳检测,用微 高感疫病辣椒材料 N‘1308’为双亲建立的群体世代中筛 量紫外分光光度计 SMA400O检测 DNA纯度和浓度 ,并 选到 2个 E SSR标记 E73、E318,这 2个标记与疫病
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