赛庚啶-苏州大学教务部.PPT

赛庚啶对多发性骨髓瘤细胞PI3K/AKT信号通路的影响 莙政学者：李 洁 苏州大学 指导教师：毛新良 苏州大学 课题研究背景 课题研究背景 * * * 课题概述 1、课题研修背景 2、课题研修技术路线与研究内容 3、课题研修材料方法与结果 4、课题总结 赛庚啶（二苯环庚啶 ） 赛庚啶是常用的抗过敏药物。通常适用于过敏反应所引起的各种疾病，如接触性皮炎、鼻炎、支气管哮喘等。其主要作用机理为抑制组胺受体，是组胺受体的抑制剂。 最近的研究发现，赛庚啶可以抑制恶性血液病细胞增殖，并诱导其凋亡。 Cyproheptadine 赛庚啶抗肿瘤作用 多发性骨髓瘤细胞 急性白血病细胞 Mao X. et al, Blood, 2008 课题研究背景 赛庚啶与硼替唑咪联合治疗套细胞淋巴瘤 B: 硼替唑咪 Cy：赛庚啶 British Journal of Haematology, 2009 PI3K/AKT信号通路 课题研究背景 PI3K/AKT信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一，通过影响下游多种效应分子的活化状态，在细胞内发挥抑制凋亡，促进增值的关键作用。 PI3Ks（磷脂酰肌醇3激酶）是脂激酶家族成员，可通过磷脂酰肌醇3位的磷酸化产生PIP3（磷脂酰肌醇三磷酸酯）它作为第二信使，是AKT（又名蛋白激酶B，PKB）转位于胞膜并被活化所必需的。 PI3K激活的AKT可以通过磷酸化作用激活或抑制其下游靶蛋白Bad、Caspase9、mTOR、P21等，从而介导类胰岛素样生长因子等诱发的细胞生长，促进细胞存活，属于重要的抗凋亡因子。 Initiation of PI3K/AKT Signaling Pathway 课题研究背景 课题研究背景 Targeting at PI3K-AKT signaling Pathway for Molecular Cancer Therapy 多发性骨髓瘤细胞 课题研究背景 多发性骨髓瘤(MM )是浆细胞在骨髓内以恶性克隆性增殖伴单克隆免疫球蛋白产生为特征的一种造血系统恶性克隆性疾病。 主要表现为骨髓瘤细胞增殖、浸润和破坏骨组织及髓外其它组织等。多发性骨髓瘤是一种中老年恶性疾病, 目前，常规的一些化疗效果比较差。 CYP 72hr 多发性骨髓瘤细胞株 课题研修技术路线与研究内容 Western Blot：p-Akt （通路上游蛋白） 其他相关蛋白： Cdk-9、 Cyclin D2 p21、p27 凋亡相关蛋白： 细胞周期相关蛋白： caspase-3，-9，-8、Bcl-2、Mcl-1、XIAP Western Blot MTT assay （通路下游蛋白） 24h 2h IGF-1诱导 （15min） Control Cyp S14161 （赛庚啶） 骨髓瘤细胞株 课题研修材料方法与结果 赛庚啶抑制多发性骨髓瘤细胞的增殖 Cyproheptadine (mM) Cell Viability (%) 12 课题研修材料方法与结果 赛庚啶对原发性多发性骨髓瘤细胞具有选择性诱导凋亡作用 Cell Viability (%) 课题研修材料方法与结果 赛庚啶抑制PI3K活性 DM DM LY Bud CYP CQ Dex PIC - + + + + + + + KMS11 IGF1 pAKT (Ser473) Total AKT DM DM LY Bud CQ CYP Dex PIC - + + + + + + + IGF1 pAKT (Ser473) Total AKT 骨髓瘤细胞KMS11经无血清培养基处理过夜后，给予100μM的不同药物处理2 hr，然后IGF-1诱导15 min，用Western blot检测磷酸化Akt（p-Akt）和总Akt（Total-Akt）的表达情况。 课题研修材料方法与结果 赛庚啶抑制了Akt的磷酸化（浓度梯度） OPM-2 [ μM ] P-Akt IGF-1 Total-Akt GAPDH - + + + + 0 0 50 100 100 CYP S1416