动物细胞融合-----鸡血细胞体外融合.pptx

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动物细胞融合-----鸡血细胞体外融合

动物细胞融合-----鸡血细胞体外融合;细胞融合(cell fusion);细胞杂交(cell hybridzition);同核体:由同一亲本细胞融合而来。 异核体:由不同亲本细胞融合而来。;物理法:显微操作、激光诱导、电刺激。 化学法:盐类融合剂、PEG法。 生物法:仙台病毒HVJ法。;PEG诱导融合;细胞融合过程;实验步骤;2.鸡血细胞的处理 取鸡血细胞储备液1mL,加入4mL生理盐水,混匀后,800rpm离心5~6min,弃上清,用5mL生理盐水重悬浮沉淀,重复离心操作1次。;4.PEG诱导细胞融合 吸取1mL鸡血悬液放在离心管中,逐滴加入37℃的50%PEG约0.5mL,边加边轻轻摇动试管,混匀后于37℃水浴静置15min。;6.制备细胞悬液 用吸管轻轻吹打细胞团数次使其分散,离心使细胞沉淀,用Hanks缓冲液重悬浮;操作流程简图;镜下观察图像示例;注意事项:; 2.50%的PEG一定??保持在37°C水浴中,防止冷却后结晶析出。

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