铜离子过氧化氢体系中荧光法测定西维因产生羟自由基的初步研究.pdfVIP

Ⅲ 农药合成与分析 225 铜离子一过氧化氢体系中荧光法 测定西维因产生羟自由基的初步研究* 李东昊 饶震红 张佩莉 刘 辉 周心玉 孙 英① (中国农业大学理学院应化系，北京100094) 摘要西维因是一种常见的农药，它能产生特征荧光，最大激发波长和发射波长分别为 281 nm，340 nm。在酸性介质下，Cu”一HzO。体系能使农药西维因产生羟自由基。羟自由基氧化 西维因，使其发生荧光猝灭，造成荧光值的改变。△F与西维因溶液浓度呈一定的线性关系。 关键词西维因荧光法检测方法羟自由基铜离子 1 引言 氨基甲酸酯类农药是一种广泛使用的农药L1j，随着近年来其用量的逐渐增加，它对人和 其他生物体的危害日益严重，对其的分析研究也日益受到人们的重视LzI。西维因是氨基甲酸 酯类农药较为常见的一种，它具有荧光特性，能够被荧光法测定，并且当在传统的Fenton模式 3l。 (Fd+H：O。)下能产生羟自由基L 羟自由基(·OH)是一种氧化能力很强的自由基，它能发生电子转移，夺取氢原子和发生 羟基化反应，使糖类、氨基酸、蛋白质、核酸及脂类等发生氧化而造成损伤和破坏L5J。因此，研 究羟自由基是很有必要和具有现实意义的。然而，虽然目前国内外对于羟自由基的离体检测 方法有很多，例如电子自旋共振法、高效液谱法、气谱法、生物传感器法、化学发光法、分光光度 法等L8’10]，但是几乎都存在或多或少的问题E4，7|。 性，可以利用荧光法进行检测[6]，因此在过氧化氢与铜离子共存的体系中，如果随着西维因溶 液浓度的改变，荧光值也发生较大变化，则说明在Cu抖代替Fe2+的Fenton模式中，农药西维 因也能产生羟自由基，使荧光值发生猝灭，并且能够被荧光法检测。实验结果表明，在Cu2+一 H。O。体系中西维因产生了羟自由基，发生了荧光猝灭。 2实验部分 2，1仪器和药品 日立F-4500荧光分光光谱仪(日本Hitachi公司)，荧光池为1cm石英池；雷磁PHS一3C *理科基地创新基金资助 作者简介：李东吴，1983年生，男，汉族，化学理科基地学生 ①通讯联系人：孙荚，理学博士，教授。主要从事环境分析化学和环境毒理学的研究。 地址：北京市圆明园西路2号中国农业大学理学院应化系。电话：010 E—mail：Sunybj@sohu．comSunybj@yahoo．corn 226 农药与环境安全国际会议论文集 型酸度计(上海精密科学仪器有限公司)；电热恒温水浴锅(天津华北实验仪器有限公司)；普析 通用仪器公司TU一1901型紫外分光光度计。 西维因(购自北京百泰生物科技有限责任公司)；其他所用的试剂都为分析纯，实验所用水 都为二次蒸馏水。 2．2实验方法 产生。实验发现，Cu2+也可以与Hz 02作用，类似Fenton反应产生羟自由基，其原理如下： Cu2++Hz02一Cu2+OH一+·OH 由此，确立羟自由基的产生量与荧光值的改变量之间的对应关系。 2．2．2 实验条件的优化 向数只10mL的比色管中各分别加入2mL的浓度为 240 t*g／mL的西维因溶液，加入定量的过氧化氢溶液和一定pH值的磷酸氢二钠一磷酸二氢 钠缓冲液，然后加入不同浓度的硫酸铜溶液，用二次蒸馏水迅速定容，在常温25℃下，经过 10 rain后进行测量，记录结果。 2．2．3羟自由基的测定 在10mL的比色管中依次加入2mL的浓度为240／．tg／mL的 西维因溶液，一定量的过氧化氢溶液和一定pH值的磷酸氢二钠～磷酸二氢钠缓冲液，以及一 定浓度的硫酸铜溶液，用二次蒸馏水迅速定容并摇匀。10min以后，测定荧光值，记录结果。 2．2．4方法的重现性同上，平行测定11次，并记录结果。 3结果和讨论 3．1 荧光光谱 200 农药西维因溶液以1 nm／min的扫描速度进行扫描，确定最大激发波长为281nm，最 大发射波长为340nm(以下荧光光谱与此相同)。 3