第四章,色谱分析仪器与技术.pptVIP

一、数据处理系统 1. 积分仪 主要有模拟和数字积分仪两种类型。主要功能是得出色谱图上的峰面积。 积分仪可以准确地计算出峰面积，为定量分析打下基础。 2. 色谱工作站 硬件是指信号采集单元，将色谱仪输出的电压信号转变为电脑能够接受的离散数字信号，起着电脑与色谱仪之间的接口转换作用。 软件部分主要有系统软件、控制软件、采样软件和各种数据处理软件包；接受色谱信号数据，提供人机窗口界面，对色谱图进行各种处理的参与仪器的自动控制的计算机程序集。 一、数据处理系统 数字积分仪 二、计算机在色谱仪中的功能 1.分析信息处理 ①峰的处理；②计算峰高；③峰面积积分。 2.数据演算功能 进行总和校正、成分比率、移动平均、线性多项式演算等数据计算。 3.程序控制功能 实现程序升温、程序变流速、梯度洗脱、程序变压、阀门切换、流路切换、衰减程序、大气压平衡等一系列程序操作，自动控制色谱工作过程中的操作条件。 二、计算机在色谱仪中的功能 4.存储器的保存功能 内部电池支撑内存保存、磁盘内数据的输入和输出。 5.自动标定功能 自动标定保留时间、死时间、峰高等基本参数。 6.异常检出和显示功能 异常检出功能对信息处理器进行自检，以保证数据处理的准确性。一旦检测出异常工作情况，微机即给出提示信息，报警并自动关闭仪器。 7.外部输出功能 ①记录器输出各种图；②数据计算机输出并打印记录；③报警输出并自动停机。 第五节 色谱仪在临床实验室的应用 一、气相色谱仪在临床实验室的应用 人体微量元素的测定； 血与尿等体液中各种化合物的测定； 人体代谢产物的分析； 药物的组成和含量分析与鉴定。 气相色谱仪和质谱仪的联用技术可以分析百余种违禁药品。 二、高效液相色谱仪在临床实验室的应用 1.激素水平测定 区分内源性、外源性胰岛素，研究胰岛素的构型变化。 2.治疗药物监测 抗癫痫类、抗忧郁类、治疗心血管病、巴比妥类、免疫抑制剂、抗肿瘤药物等。 高效液相色谱法、气相色谱法、气相色谱-质谱联用技术等成为常用的治疗药物浓度分析方法。 3. 生物胺的检测 高效液相色谱-质谱联用技术检测血浆、尿液或组织中儿茶酚胺类物质浓度的变化，用于协助诊断高血压、嗜铬细胞瘤等疾病。 高效液相色谱法分析组胺可作为过敏性疾病诊断的一项辅助性指标。 二、高效液相色谱仪在临床实验室的应用 4. 其他生化指标的测定 （1）高效液相色谱法分析红细胞膜磷脂成分的变化，为预防糖尿病血管并发症、糖尿病的治疗监测提供必要的辅助诊断参考。 （2）离子交换高效液相色谱法是测定HbA1c的标准方法。 （3）用高效液相色谱法测定血浆总胆固醇、脂蛋白能有效避免其他甾醇对测定结果的干扰。 （4）用反相高效液相色谱法可分离白血病细胞和慢性粒细胞性白血病细胞中的差异蛋白，对白血病的诊断有一定的帮助；高效液相色谱法还可测定恶性血液病患者血液中的假尿嘧啶核苷，对恶性血液病的诊断有一定价值。 主要差别： （1）操作条件差别 （2）进样方式差别 （3）检测器差别 （4）流动相差别 （5）分析对象差别 本章小结 色谱法可对多组分混合物样品进行分离分析。 样品进入色谱仪后经流动相冲洗到达固定相，由于不同样品中的组分在流动相和固定相中的分配系数不同，实现样品的分离。 色谱仪最常用的有气相色谱仪（GC）和高效液相色谱仪（HPLC）两类。 GC具有高分辨率、高速度、高灵敏度及选择性好等优点，但要求样品也必须为气态。 常用的监测器有热导检测器、氢火焰离子化检测器等。 HPLC检测的样品为液态，操作基本上可以在室温的条件下完成，比较适合自然状态下大多数样品的分析。常用的监测器有紫外及可见光检测器、二极管阵列检测器等。 Thank you ! 六、气相色谱仪的工作原理 气态样品或经气化室气化了的液态样品被载气（流动相）带入色谱柱（固定相）。在色谱柱中经过多次反复吸附—脱附—析出的分配过程后，依次离开色谱柱，进入检测器；检测器把流入的组分定量的转换成电信号，经放大处理后，送往显示与记录系统，从而得到被测样品各个组分的色谱图。 柱参数的合理选择影响分离效果，柱参数就是有关色谱操作的所有参数的统称。 气相色谱仪的流程图 六、气相色谱仪的工作原理 气相色谱仪的参数选择 1.色谱柱和填料 所有新色谱柱使用前必须经老化处理以除去填料中的污染物和减轻对检测器的污染。 2.色谱柱长 选择柱长的依据是分离度和分离速度。 3.载气流速 以兼顾灵敏度和分辨率为出发点。 六、气相色谱仪的工作原理 气相色谱仪的参数选择 4.进样器和检测器的温度 温度比恒温箱最高温度高出25～50℃，防止样品组分冷凝。 5.恒温操作 温度一般要求比样品最高沸点低40℃左右。 原则是温度每上升