第三组微生物实习报告.docVIP

实 习 报 告 实习名称 食品微生物检验实 系 别 生物与化学工程系 年级专业 07级食品质量与安全专业 学生姓名 Xxx 指导老师 Xxx 邵 阳 学 院 2010 年 12 月 5 日 生物性危害项目检测 一、实习时间、地点和实习单位： 实习时间： 2010年11月22日至2010年12 月5日 实习地点：生物与化学工程系实验楼（3#104、106、108） 实习单位：07食品质量与安全班食品微生物检测实习第三组 实习过程概述： 时间 主要内容 2010年11月18日 实习动员 实习准备 2010年11月22日—23日 资料查阅、方案拟定，交指导老师审阅 2010年11月24日 找仪器、药品及配制好所有需要的试剂 2010年11月25日—28日 酸奶中细菌总数的测定 2010年11月29日—12月2日 新鲜鸡蛋与培养非新鲜鸡蛋霉菌和菌落总数的对比检测 2010年12月3日 交还实验药品及仪器，打扫实验室卫生 2010年12月4日—5日 整理实习报告，并上交 三、主要实习岗位和实习内容 1、主要实习岗位：邵阳学院学院微生物实验室 2、实习内容：⑴检测酸奶中的菌落总数 ⑵检测新鲜鸡蛋与经培养后的鸡蛋中菌落总数的变化 ⑶检测新鲜鸡蛋与经培养后的鸡蛋中霉菌的变化 酸奶中的细菌含量检测 1、基本原理???平板菌落计数法又称标准平板活菌计数法（standard plate count，简称SPC法），是最常用的一种活菌计数法。它是根据微生物在高度稀释条件下于固体培养基上所形成的单个菌落，是由一个单细胞繁殖而成，这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。计数时，根据待检样品的污染程度，做10倍递增系列稀释，制成均匀的系列稀释液，促使样品中的微生物细胞分散开，使之呈单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细胞），选择其中2~3个稀释液，使至少一个稀释度的平皿中培养基内，经恒温培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数，根据其稀释液倍数和取样接种量即可换算出样品中的活菌数。??2、实验材料（1） 检样 ???（2） 培养基 ??营养琼脂培养基（即牛肉膏蛋白胨琼脂）。（3） 试剂 ???0.85%无菌生理盐水(9mL/管，225mL/250mL三角瓶内含适量玻璃珠）、75%酒精棉球。（4） 仪器与其他用具 ??无菌平皿、无菌吸管、无菌不锈钢勺、无菌称量纸、无菌吸管（1mL、10mL）、试管、三角瓶、广口瓶、灭菌剪刀、灭菌镊子、三角形玻璃涂布棒、酒精灯、电子天平（0.01g）、培养箱、冰箱、恒温水浴锅、微波炉、匀质器或乳钵等。 3、操作步骤1检样→做几个适当倍数的稀释液→选择2~3个适宜的稀释度各以1mL量加入灭菌平皿内→每皿加入适量营养琼脂混匀→（36±1）℃，（24~48）h±2h培养→菌落计数→报告2营养琼脂培养基配制蛋白胨　　　　10g牛肉膏　　　　3g 氯化钠　　　　5g琼脂　　　　　15～20g蒸馏水　　 1000mL将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2mL，校正pH至7.2～7.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，121℃高压灭菌15min。注：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为1.5%；如作成平板或斜面，则应为2%。3检样稀释及培养（1）以无菌操作，将检样25ml放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预先置适当数量的玻璃珠），经充分振摇做成1：10的均匀稀释液。（2）用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，沿管壁徐徐注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液，下同），振摇试管混合均匀，做成1：100的稀释液。（3）另取1ml的灭菌吸管，按上项操作顺序作10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管.（4）根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择2~3个适宜稀释度，分别在作10倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌平皿内，每个稀释度作两个平皿。（5）稀释液移入平皿后，应及时将凉至46°C营养琼脂培养基[可放置在（（46±1）°C）水浴锅内保温]注入平皿15ml~20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌平皿内作空白对照。（6）等琼脂凝固后，翻转平板，置（36±1）°C恒温箱内培养（48±2）h取出，计算平板内菌落数目乘以倍数，即得1mL样品所含菌落总数。菌落计算方法①