灭菌注射用水无菌检查方法适用性.doc

编 号：SOP本号：00 药有限公司 灭菌注射用水无菌检查方法 适用性试验方案 起草人 日期 年 月 日 会 审 ： 日期 年 月 日 质量管理： 日期 年 月 日 批准人 日期 年 月 日 1 试验描述 2 2 试验依据 2 3 试验项目组成员及职责 2 4 试验内容 2 5 试验前准备 3 6 试验过程 4 7 偏差处理 8 变更控制 9 最终评价 9 10 试验周期 陕西同康药业有限公司 部门 成员 职责 QC 报告起草 QC QA QA监督 质量部 分析方法审核 该检查方法适用于灭菌注射用水的无菌检查 5 试验前准备： 5.1 人员培训： 参加试验人员名单 是否参加培训 培训考核结果 1 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 2 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 3 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 4 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 5 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 6 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 7 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 8 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 9 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 10 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 11 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 12 口是 口否 口符合规定 口不符合规定 5.2 仪器设备、标准品和试剂： 5.2.1 仪器设备 仪器名称 编号 设备操作规程 万分之一天平 pH计 集菌仪 生化培养箱 生物安全柜 快速振荡 5.2.2 标准品和试剂名称 厂家 批号 硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆胨液体培养基（TSB培养基） 沙氏葡萄糖琼脂培养基（SDA培养基） 0.9%无菌氯化钠溶液 5.2.3 指导文件 文件名称 编 号 存放地点 质量管理处 5.2.4 样品 名称 厂家 规格 批号 灭菌注射用水 本公司 5ml 6 试验过程 6.1培养基的适用性检查 对配制好的硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基无菌性及灵敏度检查均符合《中国药典》2015年版无菌检查法（通则1101）要求。 6.2菌种及菌液制备 6.2.1、菌种：金黄色葡萄球菌( Staphylococcus aureus)〔CMCC(B) 26 003〕枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）〔CMCC（B）63 501〕生孢梭菌( Clostridium sporogenes)〔CMCC(B) 64 941〕菌〕白色念珠菌( Candida albicans)〔CMCC(F) 98 001〕黑曲霉( Aspergillus niger)〔CMCC(F) 98 003〕标准菌株均自中国，工作用菌株为第代。 6.2.2、菌液制备：2.1 接种金黄色葡萄球菌胰酪大豆胨液体培养基（TSB培养基）30～35℃培养18～24h100cfu的混悬液。 6.2.2.2 接种生孢梭菌30～35℃培养18～24h100cfu的混悬液。 6.2.2.3 接种大肠埃希菌的新鲜培养物至胰酪大豆胨液体培养基（TSB培养基）30～35℃培养18～24h100cfu的混悬液。 6.2.2.4 接种枯草芽孢杆菌胰酪大豆胨液体培养基（TSB培养基）30～35℃培养18～24h100cfu的混悬液。 6.2.2.5 接种白色念珠菌沙氏葡萄糖液体培养基（SDB培养基）0～5℃培养～4h培养后，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数小于100cfu的混悬液。 6.2.2.6 接种黑曲霉沙氏葡萄糖琼脂斜面培养基（SDA培养基）上，20～25℃培养5～7d，加入含0.05%（）聚山梨酯80的无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。然后 ，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用0.05%（）聚山梨酯80的无菌氯化钠溶液100cfu的孢子上述6株菌制得菌悬液含量（每1ml含菌数）结果见表1。 表1 菌液制备计数结果 试验菌株 代 数 菌液 稀释度 接菌量ml/皿 计数结果cfu/皿 均值 cfu/ml 平皿1 平皿2 大肠埃希菌 金黄色葡萄球菌 生孢梭菌 枯草芽孢杆菌 白色念珠菌 黑 曲 霉 6.3方法适用性试验 6.3.1 供试液制备：按照《中国药典》2015年版 “无菌检查法（通则1101）”，取供试品，按无菌操作法处理，以薄膜过滤法进行试验