第八章 病毒遗传学(教案).pptVIP

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二、噬菌体的繁殖 1. 烈性噬菌体(virulent phage)及其感染周期 ● 溶菌周期(lysis):烈性噬菌体感染细菌后, 立即进行噬菌体自身繁殖,并裂解细菌细胞的过程。 ● 烈性噬菌体: 感染细菌后,立即接管细胞的合成 机构,进行噬菌体自身繁殖,最后裂解细菌细胞, 这样的一类噬菌体。如“T”系列噬菌体。 噬菌体基因表达的顺序依次为: ● early-early genes表达:多为调节基因,启动自 身基因表达,抑制宿主细胞的RNA合成,接管宿 主细胞的合成机构; 思考题:请您预测 ① am16 与am86 共感染细菌时,这两种噬菌 体能否繁殖出子代噬菌体? ② am86 与am30 共感染细菌时情况又如何 ? ③ 你能否给出一个指导性的意见,即:哪些 类别间可能发生互补,哪写则不会发生互 补作用?(回到上表) T4 基因组 4. фX174 噬菌体的杂交试验: ① 利用 фX174 的 sus 突变(抑制基因敏感突变) 测验两基因间以及一个基因内部重组的可能性及重 组值。 ● фX174 的条件致死突变型 am3,am7,am27 E 突 变 型 顺反子 am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28 A am14,am16,och6,ts9,tsl16,och1,och8,och11 B och6 C amN1,am23,am80,ts4 am9,am32.tsr,ts79 am87,am88,am89,amH57,op6,op9,tsh6,ts41D am10,amH81 H G F D ② фX174 的三点试验与基因定位 病毒品系: 品系Ⅰ: amA tsC + 品系Ⅱ: + + amB 基因说明: amA—— gene A 的一个 amber 突变 amB—— gene B 的一个 amber 突变 tsC —— gene C 的一个温度敏感突变 (42℃时不能繁殖,30 ℃ 能繁殖) 实验目的:确定三基因在染色体上的位置关系。 试验设计: ? 提示: 两个病毒品系对繁殖条件(宿主、环境)的要求是什么?病毒的重组在哪里进行 ?只有搞 清楚了这二个问题才能做好实验设计。 根据对二品系的遗传分析设计实验 A. 基因型分析 ● 都是amber突变,因而都不能单独在 E. coli su – 细胞内繁殖,但是能够在 E. coli su + amb 细胞内繁殖。 ● tsC 突变基因存在,适当该基因携带者只能在 30℃培养温度条件下繁殖,不能在42℃下繁殖。 ● 二品系(amA tsC +, + + amB)间重组能 够产生出+ + tsC 和 + + +基因型的重组子,而 这两种重组子可以利用温度条件进行筛选。 ● 两种噬菌体的重组,是在共同感染宿主细胞时, 在宿主细胞中进行DNA后实现的 amA + tsC tsC amA + amA tsC + + + amB + amB + + + amB tsC 在中间: amA tsC amB + tsC + + + + SCO SCO 二者数 量差异 不大 + + tsC + + + SCO DCO tsC + + + + + DCO SCO B. 三基因间可能的排列顺序以及重组结果的预测 多 少 少 多 tsC 更靠近 amB 即: amA amB tsC tsC 更靠近 amA 即: tsC amA amB 实

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