中药化学第五章 色谱分离技术-吸附色谱、聚酰胺.pptVIP

影响聚酰胺吸附能力的主要因素如下： 1. 形成氢键的能力与溶剂有关。一般聚酰胺在水中与化合物形成氢键的能力最强，在有机溶剂中较弱，在碱性溶剂中最弱。因此溶剂对聚酰胺的洗脱能力的次序为： 水〈甲醇或乙醇〈丙酮〈稀氢氧化钠溶液或稀氨水〈甲酰胺或二甲基甲酰胺。 2. 与被分离成分的结构有关 与聚酰胺形成氢键的基团越多，吸附力越强。如间苯三酚〉间苯二酚〉苯酚。 形成氢键基团所处位置不同，被聚酰胺吸附的强弱也不同。如对位及间位的吸附力大于邻位。 芳香化程度越高，吸附能力越强。 Ⅰ Ⅱ 比较对聚酰胺的吸附力 应用：分离酚类、黄酮类等化合物，也可分离生物碱、萜等，去除鞣质。 聚酰胺色谱操作类型 聚酰胺薄层色谱 聚酰胺柱色谱 聚酰胺色谱的制备方法 聚酰胺薄层色谱又叫聚酰胺片，直接购买，聚酰胺片可再生反复使用。 聚酰胺柱色谱制备操作与吸附柱色谱类似，常用湿法装柱，即取聚酰胺粉用水浸泡1 h，搅匀装柱。洗脱液必须以水为基本溶剂进行洗脱。 聚酰胺色谱的应用 聚酰胺对黄酮、酚类、醌类成分分离效果较好，并广泛应用于生物碱、萜类、甾类、糖类等极性化合物与非极性化合物的分离。 另外对鞣质的吸附几乎不可逆，吸附力特强，因而特适合植物粗提液的脱鞣处理。 聚酰胺薄层色谱范围较广，特别适用于含游离酚羟基的黄酮及苷类。常用于分离黄酮及苷类的展开剂有乙醇-水（3：2）、水-乙醇-乙酰丙酮（4：2：1）、丙酮-水（1：1）、水饱和的正丁醇-醋酸（100：1）等。 聚酰胺柱色谱的样品分离量大，适于制备性分离。 4、常用吸附剂简介 （1）硅胶 硅胶简介： 极性吸附剂硅胶是一种是微呈酸性的多孔性物质， 常用SiO2?xH2O表示。 其骨架表面具有很多硅醇基，使硅胶能与许多化合物形成氢键而产生吸附作用。游离硅醇基数目的多少决定了硅胶吸附作用的强弱。硅醇基也容易通过氢键与水结合，随含水量的增加，硅胶表面的游离硅醇基数目减少，硅胶吸附其他化合物的能力便随之减弱。 硅胶含水量在17%以下才作为吸附剂。吸附能力来源于化合物形成的氢键。活化温度一般在100～120℃烘24 h，显弱酸性，适用于中性和酸性成分的分离。 常用硅胶种类 硅胶H（不含黏合剂） 硅胶G（含黏合剂） 硅胶GF254(含煅石膏，另含有一种无机荧光剂) 为极性吸附剂，吸附能力比硅胶稍强。色谱用氧化铝有碱性（pH9.0）、中性（pH7.5）和酸性（pH4.0）三种。 中性氧化铝适用于醛、酮、萜、生物碱、皂苷等中性或对酸碱不稳定成分的分离；酸性氧化铝适用于有机酸、氨基酸等酸性成分及对酸稳定的中性成分的分离。碱性氧化铝适用于碱性和中性成分的分离。其中中性氧化铝使用最广泛。 （2）氧化铝 聚酰胺（商品名又称绵纶、尼龙）是由酰胺聚合而成的一类高分子化合物。 不溶于水及常用的有机溶剂，对酸稳定性差，对碱较稳定。吸附能力来源于化合物形成的氢键。 聚酰胺色谱法是利用作为固定相的聚酰胺分子内存在的许多酰胺基，能与酚类的羟基、酸类的羧基及醌类的醌基形成氢键而产生吸附，是混合物中各成分得到相互分离的方法。 （3）聚酰胺 （二）展开剂（移动相、流动相） 1、是一种溶剂或两种或两种以上的溶剂组成的溶剂系统，要经过纯化处理。主要作用是解吸附。应将吸附剂活性、被分离成分极性综合考虑选择移动相。 2、种类 亲脂性有机溶剂：石油醚、环己烷、四氯化碳、苯、甲苯、乙醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇等。 亲水性有机溶剂：丙酮、乙醇、甲醇等。 极性溶剂：水。 3、解吸附能力 展开剂的解吸附能力的大小与选择展开剂的极性和被分离成分的极性大小有关。 一般来说，当选用常用的硅胶或氧化铝这类极性吸附剂时，展开剂的极性越大，解吸附能力越强，否则越弱。 被分离成分的极性大，展开剂的极性也要大；反之，分离极性小的成分就要选择极性小的展开剂。 4、常用溶剂极性大小比较 常用移动相极性大小次序： 石油醚 ＜环己烷＜CCl4＜C6H6＜Et2O＜CHCl3＜EtOAC＜n-BuOH＜Me2CO＜EtOH＜MeOH＜H2O （三）被分离成分 若用极性吸附剂，被分离成分极性大者吸附牢固，解吸附就困难，色谱中展开的速度慢，反之，吸附能力弱，解吸附就容易。 化合物极性大小判断原则一般如下： 1. 分子中母核相同，极性基团越多，极性越大； 2. 分子中双键、共轭双键越多，极性越大； 3. 同系物中，分子量越小，极性越大； 4. 在同一母核中不能形成分子内氢键的化合物比能形成分子内氢键的化合物极性大。 常见的取代基极性大小比较如下： 烷基