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应用抑制消减杂交(SSH)克隆肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因.PDF
第 23 卷第 2 期 第 三 军 医 大 学 学 报 Vol. 23 , No. 2 2001 年 2 月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE Feb. 2001 131 ( ) 文章编号 2001 论著 应用抑制消减杂交( SSH) 克隆肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因 ( ) 陈 杰 ,钱桂生 ,黄桂君 ,熊 玮 ,李 靖 第三军医大学附属新桥医院全军呼吸内科研究所 ,重庆 400037 ( ) 提 要 : 目的 克隆和筛选肺腺癌多药耐药细胞特异表达基因。方法 将肺腺癌多药耐药细胞 SPCA1/ CDDP 作为实验组 , ( ) 肺腺癌细胞 SPCA1 作为对照组 ,应用抑制消减杂交技术 ,构建实验组特异表达 cDNA 消减文库 ;用斑点杂交初步筛选 cDNA 消减 ( ) ( ) 文库后 ,将获得的阳性克隆进行测序和同源性分析 Genebank 。结果 建立了一个肺腺癌多药耐药细胞 SPCA1/ CDDP 特异表达 cDNA 消减文库 ,斑点杂交初步筛选显示 23 个克隆中有 SPCA1/ CDDP 特异表达 cDNA 片断 ,测序和同源性分析表明 2 个 cDNA 片断 为新序列 ,其余 cDNA 片断与已知基因有 96 %～100 %的同源性。结论 2 个新的 cDNA 序列可能为未知肺腺癌多药耐药相关基因 序列 ;抑制消减杂交是克隆特异表达基因的有效方法。 关键词 : 人肺腺癌细胞 ;多药耐药相关基因 ;抑制消减杂交 中图法分类号: R394 - 33 ;R734. 2 文献标识码 :A Suppression subtractive hybridization identified genes differentially expressed in a human lung adenocarcinoma multidrug resistance cell line CHEN Jie , QIAN Guisheng , HUANG Guijun , XIONG Wei , LI Jing ( Institute of Respiratory Diseases , Xinqiao Hospital , Third Military Medical University , Chongqing 400037 ,China) Abstract : Objective To clone and screen multidrug resistance related gene of human adenocarcinoma cell. Met
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