酪蛋白酶解制备酪蛋白磷酸肽研究-食品科学.pdfVIP

基础研究 《食品科学》 ， ， 酪蛋白酶解制备酪蛋白磷酸肽研究 过程分析与优化 齐崴 何志敏 何丽霞 天津大学化学工程研究所酶工程研究室 摘 要 以 技术跟踪间歇搅拌反应釜中酪蛋白—碱性蛋白酶抑制备酪蛋白磷酸肽 过程特性，利用水 解度 表征其反应历程。分析了温度 、 值、底物浓度 、酶浓度 及时间 等参数对 的影响，并通 过多元线性回归求得其关联式，确定出最适酶解条件为： ， ， ， ， 。 关键词 酪蛋白 碱性蛋白酶 酪蛋白磷酸肽 水解度 操作参数 ， 生物多肽大多以非活性状态存在于蛋白源长链 程，实现了对间歇搅拌反应釜 中酪蛋白——— 碱 中，可以通过适当的有限酶解反应而被释放出来，显 性蛋白酶解反应过程的定量表征，并确定了最适酶解 示出各种生理功效，是 世纪重点开发的药物和功 工艺条件，为进一步建立反应特征动力学模型提供了 能食品。 可能。 酪蛋白——— 碱性蛋白酶水解体系是制备生物活 材料与方法 性多肽——— 酪蛋白磷酸肽 的有效酶解体系。 是一种含有成簇磷酸丝氨酸残基的活性多肽，在 材料 动物小肠中性或偏碱性条件下与钙形成可溶性复合 酪蛋白：生化试剂，军事医学科学院天津市东方 物，可防止不溶性磷酸钙沉淀，从而促进钙的保持和 卫生材料厂，蛋白氮含量 ；碱性蛋白酶：无锡酶 吸收 。美、日已将其作为补钙功能食品的原料，德国 制剂厂，酶活 ；其他试剂均为分析纯。 也将其列入药典，而国内研究刚刚起步 。 仪器 目前，对 的研究主要集中于分子结构确定 自动电位滴定仪：上海雷磁仪器厂， 型；磁 、作用机理探讨 、功能性特性评价 、制备工艺改 力加热搅拌器：常州国华电器有限公司；电子继电器： 进 、以及应用开发 等，涉及酶解反应过程特性的研 黄骅市亚龙仪器仪表有限公司， 型。 究甚少。本文在详细分析各操作参数对水解度 方法 影响规律的基础上，利用多元线性回归得出其关联方 酪蛋白含量测定： 。 ， ， 《食品科学》 基础研究 碱性蛋白酶活力测定： 。 水解度定义为： 其中： 碱耗量 ， 碱摩尔浓度 ， 蛋白质质量 ， 底物中的肽键总数 ， 的平均解离度。 酶解步骤 配制一定浓度的酪蛋白溶液；在如图 所示的带 图 温度对水解度的影响 有电加热器及磁力搅拌间歇酶解实验装置中，将底物 的舒展 解聚 ，肽键更易与酶结合，酶解速率加快。 溶液升温至水解温度，并调 至要求；平衡后迅速加 的影响 入一定浓度的酶液；反应过程中通过 技术维 图 表明，随 提高，酪蛋白水解度增大， 持 恒定，根据所加碱液体积计算 值；通过加热 达到最大值，但在 和 之间出现交叉。即 和 或调