苹果mdsbp20基因抗非生物胁迫的研究-华北农学报.pdfVIP

华北农学报 ·２０１６，３１（３）：５１５７ 苹果ＭｄＳＢＰ２０基因抗非生物胁迫的研究 １ １ １ １ １ ２ １ １ 沙　婷 ，侯鸿敏 ，孟祥娜 ，柏素花 ，周爱琴 ，沙广利 ，戴洪义 ，祝　军 （１．青岛农业大学 园艺学院，山东 青岛　２６６１０９；２．青岛市农业科学研究院，山东 青岛　２６６１００） 　　摘要：为获得苹果砧木逆境胁迫相关转录因子，以 ＱＺ１（平邑甜茶（ＭａｌｕｓｈｕｐｅｈｅｎｓｉｓＲｅｈｄ．）×柱型苹果株系 ＣＯ （ＭａｌｕｓｄｏｍｅｓｔｉｃａＢｏｒｋｈ．）和 Ｍ２６为试材，利用同源克隆法克隆得到苹果 ＳＢＰ基因 ｃＤＮＡ的全长序列，命名为 ＭｄＳＢＰ２０。对扩增得到的ｃＤＮＡ序列进行生物信息学分析，结果表明，该序列全长 １３６２ｂｐ，包含完整开放阅读框 １３６２ｂｐ，编码４５４个氨基酸，具有明显的ＳＢＰ结构域，包含２个锌指结构 Ｚｎ１、Ｚｎ２和双向核定位信号区ＮＬＳ。系统 进化树分析，结果表明ＭｄＳＢＰ２０与白梨（ＸＭ＿００９３３９７２６．１）和苹果（ＸＭ＿００８３７６４３５．１）亲缘关系较近。实时荧光定量 分析结果表明，ＭｄＳＢＰ２０基因在低温、干旱、盐害中发挥一定功能，推测 ＱＺ１的耐寒性、耐旱性及耐盐性均强于 Ｍ２６。 研究表明，ＭｄＳＢＰ２０基因在苹果响应非生物逆境胁迫中具有重要调控作用。 关键词：苹果；非生物胁迫；ＭｄＳＢＰ２０基因；基因克隆；表达分析 中图分类号：Ｑ７８；Ｓ６６１．１　　文献标识码：Ａ　　文章编号：１０００－７０９１（２０１６）０３－００５１－０７ ｄｏｉ：１０．７６６８／ｈｂｎｘｂ．２０１６．０３．００８ ＳｔｕｄｙｏｎＡｂｉｏｔｉｃＳｔｒｅｓｓｏｆＭｄＳＢＰ２０ＧｅｎｅｆｒｏｍＭａｌｕｓ １ １ １ １ ＳＨＡＴｉｎｇ，ＨＯＵＨｏｎｇｍｉｎ，ＭＥＮＧＸｉａｎｇｎａ，ＢＡＩＳｕｈｕａ， １ ２ １ １ ＺＨＯＵＡｉｑｉｎ，ＳＨＡＧｕａｎｇｌｉ，ＤＡＩＨｏｎｇｙｉ，ＺＨＵＪｕｎ （１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅ，ＱｉｎｇｄａｏＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｑｉｎｇｄａｏ　２６６１０９，Ｃｈｉｎａ； ２．ＱｉｎｇｄａｏＡｃａｄｅｍｙｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｑｉｎｇｄａｏ　２６６１００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｏｂｔａｉｎｔｈｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｆａｃｔｏｒｒｅｌａｔｅｄｔｏｓｔｒｅｓｓｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｉｎａｐｐｌｅｒｏｏｔｓｔｏｃｋ，ａｎａｐｐｌｅＳＢＰｇｅｎｅ ｗｉｔｈｔｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｗａｓｃｌｏｎｅｄｉｎＱｉｎｇｚｈｅｎ１（ａｐｏｍｉｃｔｉｃｃｒａｂａｐｐｌｅＰｉｎｇｙｉｔｉａｎｃｈａ（ＭａｌｕｓｈｕｐｅｈｅｎｓｉｓＲｅｈｄ．）× ｃｏｌｕｍｎａｒａｐｐｌｅｓｔｒａｉｎＣＯ（Ｍａｌｕｓ×ｄｏｍｅｓｔｉｃａＢｏｒｋｈ．）ａｎｄＭ２６ｖｉａｈｏｍｏｌｏｇｙｂａｓｅｄｃｌｏｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅｇｅｎｅ ｃｌｏｎｅｄｗａｓｎａｍｅｄａｓＭｄＳＢＰ２０．ＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓｔｏｔｈｅｃＤＮＡｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｆｕｌｌｌｅｎｇｔｈｃＤＮＡｗａｓ１３６２ ｂｐ，ｉｔ′ｓｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅｐｏｓｓｅｓｓｅｄ１３６２ｂｐ，ａｎｄｅｎｃｏｄｅｄ４５４ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ，ｗｈｉｃｈｈａｄｏｂｖｉｏｕｓｌｙＳＢＰｄｏｍａｉｎ ａｎｄｔｗｏｚｉｎｃｆｉｎｇｅｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ（Ｚｎ１，Ｚｎ２）ａｎｄｔｈｅｂｏｔｈｗａｙｎｕｃｌｅａｒｌｏｃａｔｉｏｎｓｉｇｎａｌ（ＮＬＳ）．Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄｔｈａｔＭｄＳＢＰ２０ｇｅｎｅｈａｄｔｈｅｃｌｏｓｅｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈＰｙｒｕｓｂｒｅｔｓｃｈｎｅｉｄｅｒｉ（ＸＭ＿０