像产品经理一样思考——IVD行业漫谈.pptVIP

什么叫产品经理？ 产品经理：Steve Jobs 产品经理：褚时健 产品经理：马化腾、张小龙 认识人类 人体小宇宙-复杂系统 人类的生存和进化与环境息息相关 从DNA组学，到蛋白质组学，到生物药 相关企业：华大基因 复杂网络之互联网站 复杂网络之蛋白质代谢 诊断与体外检测的分类 检测模式的分类 大型仪器，实现样本的集中检测 床旁检测-POCT，少量样本的快速 便携式个人检测（血糖、早早孕） 按终端客户： 三甲医院； 二三线医院 第三方实验室 典型检测设备 血细胞分析设备 三分群、五分类、流式细胞分析仪 免疫分析仪 酶免疫分析；时间分辨荧光免疫分析；化学发光免疫分析；电化学发光免疫分析 生化分析仪 半自动（低速）；全自动生化分析仪 相关上市公司介绍 中生北控 科华生物 利德曼 迪安诊断 达安基因 阳普医疗 血液制品（上海莱仕、华兰生物） 非上市公司介绍 北京万泰 广州万孚 科美东雅 长春迪瑞 华大基因 博奥生物 杭州艾康 北京蓝十字…… Case Study:热点领域-化学发光 国际巨头：雅培（AMPPD）、罗氏(三联吡啶钌)、西门子/拜耳（吖啶酯）、强生、贝克曼 国内企业：北京科美、深圳新产业、山东威高等 技术指标 发光免疫发比酶免和放疫的灵敏度高1~2个数量级 酶免放免：灵敏度10-15~10-16 化学发光：灵敏度10-17~10-19 分析步骤 1.甲状腺激素 2．生殖激素 3．垂体激素和皮质激素 4．贫血因子 5．肿瘤标志物 6．感染性疾病 7．糖尿病 胰岛素、血清C-肽、血浆胰高糖素等。 8．心脏标志物 9．病毒标记物 10．过敏性疾病 11．治疗药物监测 第二节 化学发光剂和标记技术 在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物，称为化学发光剂或发光底物。 一、化学发光剂 能作为化学发光剂的条件： ①发光的量子产率高； ②它的物理-化学特性要与被标记或测定的 物质相匹配； ③能与抗原或抗体形成稳定的偶联结合物； ④其化学发光常是氧化反应的结果； ⑤在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性。 ㈠直接化学发光剂 直接化学发光剂在发光免疫分析过程中不需酶的催化作用，直接参与发光反应，它们在化学结构上有产生发光的特有基团，可直接标记抗原或抗体。 ?? 1. 吖啶酯 在碱性条件下被H2O2氧化时,发出波长为470nm的光，具有很高的发光效率，其激发态产物　N-甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。 2．三联吡啶钌 三联吡啶钌 [RU(bpy)3]2+是电化学发光剂，它和电子供体三丙胺（TPA）在阳电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。 三联吡啶钌 电化学发光剂反应原理 ㈡ 酶促反应发光剂： 是利用标记酶的催化作用，使发光剂（底 物）发光，这一类需酶催化后发光的发光剂 称为酶促反应发光剂。 1．鲁米诺及其衍生物 2．AMPPD 1．鲁米诺 鲁米诺发光原理 鲁米诺增强发光反应原理 2．AMPPD 〔3-(2‘-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3“-磷酰氧基)苯-1,2-二氧杂环丁烷〕〕 1. 碳二亚胺（EDC）缩合法 二、发光剂的标记技术 2. 过碘酸钠氧化法 3．重氮盐偶联法 4. N-羟基琥珀酰亚胺活化法 1．发光剂的选择 2．被标记蛋白质的性质 3．标记方法的选择 4．原料比 5．标记率 6．温度 7．纯化与保存 影响标记的因素 第三节 化学发光免疫分析的类型 用吖啶酯直接标记抗体(抗原)，与待测标本中相应的抗原(抗体)发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-吖啶酯标记抗体复合物，这时只需加入氧化剂（H2O2）和NaOH使成碱性环境，吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发光 。 由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能，这部分光的积分与待测抗原的量成正比，可从标准曲线上计算出待测抗原的含量。 一、直接化学发光免疫分析 发光 Y Y Y 磁微粒 被测抗原 + 抗体 + 带丫啶酯标记物抗体 Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y 冲洗后 --- 夹心法 （1） 加入H2O2 （pH10） （2） 加入碱 （pH10） 直接化学发光的机理 磁微粒模式图 Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y Y 特点 抗原和抗体结合与未结合部分的易分离 磁微粒技术 化学发光酶免疫分析（chemiluminescence enzyme 　immunoassay，CLEIA）是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根