骨髓基质干细胞移植对扩张型心肌病心衰大鼠心功能改善作用机制的.pdfVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2013, 40(9): 859~865 骨髓基质干细胞移植对扩张型心肌病心衰大鼠 心功能改善作用机制的研究 1) 2)* 1) 周瀛 白小涓 王 勃 1) 2) ( 国医科大学附属第一临床医院循环内科，沈阳110001； 中国医科大学附属第一临床医院老年病科，沈阳110001) 摘要 通过对心肌胶原纤维、微血管生成、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体表达的研究，探讨骨髓基质干细胞(BMSSCs) 心肌内移植对扩张型心肌病心衰大鼠心功能的保护机制 应用阿霉素注射法建立扩张型心肌病心衰大鼠模型，成功建模后移 植4, 6- 二乙酰基-2- 苯基吲哚(DAPI)标记的BMSSCs 分别于 后 1、2、3、4 周进行血流动力学检测，利用免疫组化、 RT-PCR 技 分析心肌胶原纤维、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体Flt-1 、Flk-1 表达的改变，以及微血管密度 结果显示， 移植细胞于 后4 周通过免疫荧光可检测到存活 于 后2 周开始，移植组心功能较对照组改善，表现为移植组收缩压 (LVSP)、左心室内压最大上升或下降速率( d /d )较对照组显著升高，舒张压(LVDP)显著下降， 0.05 移植组心肌胶原纤 p t P 维沉积减少，光密度值比较 0.05 移植组VEGF、Flt-1 、Flk-1 表达较同期对照组增加，并张且与其受体达峰时间不同 P 步 4 周时移植组微血管密度明显高于对照组 上述结果表明，BMSSCs 移植后可通过上调受体内VEGF、Flt-1、Flk-1 的表 达，促进血管新生，减少胶原纤维沉积，从而改善受体心脏的功能 关键词 骨髓基质干细胞，扩张型心肌病，心肌细胞成形 学科分类号 R363 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2012.00632 随着干细胞技 的深入发展，骨髓基质干细胞 小鼠IgGFITC 荧光标记试剂，兔抗 鼠VEGF、 (bone marrow stroma stem cell，BMSSCs)作为 体 Flk-1、Flt-1、CD34( 武汉博士德生物工程有限公 细胞移植到各种原因所致的心肌细胞受损的受体心 司) ；Masson 试剂盒，免疫组化超敏S-P 工作液试 脏内，已成为治疗心力衰竭的新途径 研究表明， 剂盒，DAB 显色试剂盒(福州迈新生物技 开发有 BMSSCs 能够促进缺血性心肌梗死和非缺血性心肌 限公司) ；盐酸阿霉素(浙江海正药业股份有限公 病所致心力衰竭的心功能恢复[1-2] 多数学者认为 司) ；RT-PCR 试剂盒(宝生物工程大连有限公司) BMSSCs 移植改善缺血心脏功能的机制与血管生成 1 2 细胞的分离培养标记及鉴定 [3-4] [5-6] 取雄性Wistar 大鼠， 及其相关受体有关 ，但对于扩张型心肌病 按照之前研究的方法 BMSSCs 移植对心功能改善机制的研究目前报道较 体重130～150 g，麻 后剥离双后肢皮肤肌肉，于 少 本研究应用阿霉素注射法建立扩张型心肌病心 髋关节处剪断，无菌条件下冲洗取到胫、股骨的骨 衰大鼠模型，观察BMSSCs 移植对受体心脏心肌 髓细胞，离心弃上清，混悬离心后加入DMEM 充 胶原纤维沉积、血管内皮生长因子(VEGF)及其受 分吹打，接种于培养瓶，置于培养箱 温育，通过 体的表达的影响，探讨BMSSCs 移植改善扩张型 换