基于高效液相色谱技术的食品生物毒素检测实验教学探索.pdfVIP

麟 基于高效液相色谱技术的 食品生物毒素检测实验教学探索 李志文 ，李 航 ，张爱琳 ，王 娜，闰师杰 (天津农学院 食品科学与生物工程学院，天津 300384) 摘 要：为了提高食品质量与安全专业学生对食品中生物毒素检测方法的理解和掌握，天津农学院 食品科学与生物工程学院在食品质量与安全综合实验课程 中将高效液相色谱技术应用于生物毒素检 测本科教学实验当中。以马铃薯、花生和苹果汁为研究对象，应用高效液相色谱技术分别测定马铃 薯中龙葵素的含量、花生中黄 曲霉素的含量以及苹果汁中棒 曲霉素的含量 。通过实验，不仅加强了 学生基本实验技能的训练，而且培养和提升了学生的科研思维及综合运用知识的能力，更好地实现 了食品质量与安全专业的培养 目标。 关键词 ：生物毒素 ；教学改革；实验技能；高效液相色谱 食品中的生物毒素是指 由食源性动植物活细胞 少利用 HPLC开展生物毒素教学实践 。这就在一定 所产生的一类具有 自身防卫作用的、不可 自我复制 程度上 限制 了当前生物毒素检测人才队伍 的发展 。 的有毒化学物质 ，包括动物 、植物、微生物产生 的 为了能够让学生亲身实践不 同种类生物毒素 的 对其它生物物种有毒害作用 的各种化学物质 ，亦称 HPLC检测方法，我们设计 了马铃薯 中龙葵毒素的 自然毒素。食源性生物毒素已经成为威胁人类食品 HPLC检测技术、花生米中黄 曲霉素的 HPLC检测 安全的主要因素之一 ，对食源性生物毒素的精准、 技术、及苹果汁中棒 曲霉素的HPLC检测技术三个 快速、痕量检测随之成为食品安全检测领域教学研 综合性试验 。以期加深学生对生物毒素检测方法的 究热点。生物毒素的分析检测早期主要通过动物实 理解和掌握 ，提高学生 的实验动手能力 。 验 、常规免疫方法及普通理化分析手段等进行 。近 l 实验设计 年来，随着分析技术的不断发展 ，色谱、质谱等各 种类型的新技术越来越多地应用到生物毒素的检测 1．1 马铃薯 中龙葵毒素的HPLC检测技术 当中，生物毒素的定性与定量检测更加准确，检测 龙葵素提取方法：龙葵素 由疏水苷元和亲水寡 的灵敏度和特异性也有很大提高…。 糖链组成 ，具有一定 的光 、热稳定性 ，结构较复 食品质量与安全综合实验是本专业本科生四年 杂 ，分子量大 ，具有一定的极性 ， 目前常见 的提取 级的一 门重要必修课，是本科毕业前对食品安全检 方法有浸提法 、索 氏提取法 、回流提取法 、超声波 测能力进行综合训练 的一个重要实践环节 。其 中与 提取法和微波提取法 5种 。其 中超声波提取法具 食品安全相关的生物毒素检测实验课程多采用传统 有提取高、回收率高、提取时间短、设备简单等优 的免疫学分析法 ，如酶联免疫试剂盒或胶体金层析 点 ，适宜于教学实验课程要求 ，因此，实验采用超 试纸卡。高效液相色谱 (HPLC)技术是 目前常用 声波提取法 。 的检测化学物质的方法，已在我国多所高校教学实 提取与测定方法参考黄红苹等 、李志文等 验 中广泛应用 。我国高校开设 的基于 HPLC技术 和李美 的实验方法并加 以改进，取 20g马铃薯固 进行 的食 品安全检测实验技术课程大多集 中在农兽 体粉末，加入 80mL混合提取液 (乙醇：乙酸 =8：2， 药残 留、非法及易滥用食 品添加物 的检测领域 ，极 体积 比)进行超声波处理 (55Hz，50min)，重复2