高产糖化酶菌株紫外线诱变育种课程设计.docVIP

课 程 设 计 说 明 书 课程名称： 设计题目: 高产糖化酶菌株诱变育种 高产糖化酶菌株诱变育种（1）熟悉的基本，能够运用所学的理论知识分析设计任务（2）能正确设计，（3）分析、处理（）按时完成课程设计任务，认真、正确地书写课程设计报告。（）培养实事求是、严谨的工作态度。[1]王传荣. TH-AADY和糖化酶在食醋生产中的应用试验[J].中国酿造,2001,111(1):23-24. [2]柴宝华．固定化糖化酶在结晶糖中的应用[J]．淮海轻工学院学报，2000，9(1)：62- 64． [3]杨依军，李多川，沈崇尧．葡萄糖淀粉酶研究进展[J]．微生物学通报，1996，23(5)：312-315． [4]盛祖嘉．微生物遗传学[M]．北京：科学出版社，1987：92 96． [5]李冰洁. 黑曲霉变异株sP5-56在糖化酶生产工业中的应用[J].-微生物学杂 高产糖化酶菌株诱变育种 摘 要从土壤及霉变淀粉质材料等样品中分离获得到产糖化酶活性较高的菌株L-3，；通过紫外线进行诱变，得到4株性能良好的糖化酶变异株，其中菌株7性能最好，命名为M．F。对该菌株进行发酵性能测试，结果表明该菌株糖化酶活力比原菌株提高了20．8％；经过继代培养，证明其性状能稳定遗传。通过正交试验，确定菌株7最佳培养温度为30℃，最适值为5．5—6．0，最适培养时间为5d。关 键 词糖化酶；诱变；菌种选育；酶活力； …………………………………………………………1 1.1糖化酶简介………………………………………………………2 1.2高产糖化酶………………………………………… 3 2.设计方案…………………………………………………… 页码 2.1实验策略……………………………………………………页码 2.2材料与方法…………………………………………………培养基……………………………………………… 页码 2.3获得最佳温度最佳加水比…………………………… 页码 3.方案实施…………………………………………………… 页码 3.1从土壤中采样 o6TU#7P ?………………………………………………稀释倒平板法………………………………………… 页码 3.3控制培养条件 `mV^QD ?………………………………………………紫外诱变………………………………………… 页码 3.5菌株遗传稳定性实验…………………………………………诱变菌株进行发酵培养基优化………………………………测定糖化酶活力……………………………………………………………………………………………页码 4.1筛选结果…………………………………………………… 4.2复筛结果…………………………………………………菌种的诱变选育……………………………………………紫外诱变剂量的选择…………………………………… 4.3.2菌种紫外诱变筛选……………………………………… 4.4诱变株M．F7，遗传稳定性的检测……………………优化培养基……………………………………………… 4.6培养条件的优化………………………………………… 5.讨论………………………………………………………… 页码 6.总结与致谢………………………………………………… 页码 7.参考文献…………………………………………………… 页码 1. 设 计 背 景 1.1糖化酶简介 1.糖化酶又称葡萄糖淀粉酶[Glucoamylase,(EC.3.2.1.3.)]它能把淀粉从非还原性未端水a-1.4葡萄糖苷键产生葡萄糖，也能缓慢水解a-1.6葡萄糖苷键，转化为葡萄糖是工业上应用最广泛的酶类之一，糖化酶用于以葡萄糖作发酵培养基的各种抗生素、有机酸、氨基酸、维生素的发酵；本品还大量用于生产各种规格的葡萄糖。总之，凡对淀粉、糊精必需进行酶水解的工业上，都可适用。糖化酶我国生产糖化酶已有20多年历史，作为葡萄糖生产及发酵工业的重要酶种，其产量占全国酶制剂产量的 6％以上且产销量逐年递增。除了利用糖化酶水解淀粉为葡萄糖而用于制糖业外，现在人们越来越多地开发糖化酶的新型用途，糖化酶在酿酒工业中也有广泛的应用，传统白酒.生产用曲中的微生物是依靠自然界带人的，其糖化力较低，耐酸耐热性都较差。糖化酶作用的范围为3．0—5．5，最适作用范围为4．0～4．5，适宜发酵。作用方式：糖化酶的底物专一性较低，它除了能从淀粉链的非还原性未端切开a-1.4键处，也能缓慢切开a-1.6。因此，它能很快的把直链淀粉从非还原性未端依次切下葡萄单位，在遇到1.6键分割，先将a-1.6键分割，再将a-1.4键分割，从而使支链淀粉水解成葡萄糖。 1 明确诱变育种目的：改善菌株特性，提高产量。 2 了解影响菌株发育的主要因素：温度，PH。 3 选取准确的检测手段：淀粉--碘显色反映 4 诱变