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农杆菌介导的药百合鳞片遗传转化体系的建立-草业学报
草 业 学 报 第 卷 第 期 １６４－１６９ ２０ ６ 年 月 ， ２０１１ １２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ Ｖｏｌ．２０Ｎｏ．６ 农杆菌介导的药百合鳞片遗传转化体系的建立 ， １２ １ １ １ １ １ 储俊 ，许娜 ，张强 ，王松华 ，周正义 ，金光明 （ 安徽科技学院生命科学学院，安徽 凤阳 ； 中国科学技术大学生命科学学院，安徽 合肥 ） １． ２３３１００２． ２３００２７ 摘要：本试验以药百合鳞片高频再生体系为基础，研究了农杆菌介导的药百合鳞片遗传转化的几个影响因素。结 果表明，预培养 有利于转化；共培养 并且添加 ／ 乙酰丁香酮有利于提高转化频率并抑制了农杆 ５ｄ ３ｄ １００ ｍｏｌＬ μ 菌的过度生长；在侵染阶段添加 ／ 乙酰丁香酮，农杆菌侵染液 值 、光吸收值 ，侵染时间 １５０ ｍｏｌＬ ｐＨ ５．７ ０．８ １０ｍｉｎ μ 为最佳遗传转化体系。再生植株经 狌狊基因的瞬时表达检测及犺狋基因ＰＣＲ检测证明载体已成功整合到药百合 犵 狆 基因组中。 关键词：药百合；农杆菌；乙酰丁香酮；转化 中图分类号： ； 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｑ９４３Ｓ５６７．０３２ Ａ １００４５７５９２０１１０６０１６４０６ ［］ １ 中国是世界百合（ ）种质资源的分布中心，约有 个种、 个变种，占世界百合属总数的 以上 。 犔犻犾犻狌犿 ４７ １８ ５０％ 目前，一些分布地区窄或生态适应性弱的百合种的生存受到严重威胁。传统的百合繁殖方法主要采用常规分球、 分珠芽鳞片扦插、鳞片包埋等，但繁殖系数较小，特别是经多代分殖以后，常造成种性退化，甚至病毒积累，影响百 合的产量和质量。而利用遗传转化技术将外源的抗病毒基因整合到百合基因组上，能够提高百合对病毒的抗 ［］ ２ 性 ，加快了百合的快繁速度。 农杆菌介导的遗传转化体系研究一般在双子叶植物中进行，传统观念认为单子叶植物不是农杆菌的有效寄 主。但自 年利
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