VEGFC及TNFα在乳头状及滤泡状甲状腺癌中表达及其意义.docVIP

VEGFC及TNFα在乳头状及滤泡状甲状腺癌中表达及其意义 　作者：王景霞 徐辉 邓文伟 齐亚灵 李艳君 张辉 王淑英 李尧 李文 【摘要】 目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）C和肿瘤坏死因子（TNF）α在甲状腺乳头状癌（PTC）和甲状腺滤泡状癌（FTC）中的表达及意义。方法 采用免疫组化SP法检测甲状腺乳头状癌45例（其中31例伴颈淋巴结转移）、甲状腺滤泡状癌17例（其中3例伴颈淋巴结转移）及18例正常甲状腺组织标本中VEGFC及TNFα表达情况。结果 在甲状腺癌中VEGFC及TNFα均有不同程度的表达，在乳头状癌中表达程度高于滤泡状癌，有淋巴结转移的肿瘤较无转移的肿瘤表达升高(均P＜0.05)。结论 VEGFC和TNFα在PTC 中的表达高于FTC，提示VEGFC和TNFα可促进PTC与FTC发生淋巴转移。 【关键词】 甲状腺乳头状癌；甲状腺滤泡状癌；血管内皮生长因子C；肿瘤坏死因子α 甲状腺癌是最常见的甲状腺恶性肿瘤，约占全身恶性肿瘤的1%，占头颈肿瘤的首位。如发生淋巴及血运转移，将导致预后不良。因此本实验应用免疫组化SP法检测血管内皮生长因子（VEGF）C和肿瘤坏死因子（TNF）α在甲状腺乳头状癌（PTC）与滤泡状癌（FTC）中的表达，并且观察二者在发生局部淋巴结浸润时的表达情况，探讨其与淋巴转移的关系，为临床选择适宜治疗方案提供实验依据。 1 材料与方法 1.1 材料 收集齐齐哈尔市第一医院病理科2001～2007年手术切除病理科存档的甲状腺癌单切石蜡标本62例，男8例，女54例，年龄5～72岁。其中PTC 45例（31例伴颈淋巴结转移）、FTC 17例（3例伴颈淋巴结转移）。另选18例正常甲状腺组织（NT）石蜡包埋标本为正常对照组。 1.2 主要试剂 小鼠抗人TNFα、VEGFC单克隆抗体（武汉博士德生物技术有限公司），即用型第二代免疫组化试剂盒（福 建迈新生物技术有限公司），DAB显色试剂（福建迈新生物技术有限公司）。 1.3 方法 采用HE染色方法，并且根据WHO分类法进行病理学分类；采用免疫组化SP法检测VEGFC及TNFα表达，实验操作严格按照试剂盒说明进行，用PBS代替一抗作为阴性对照，试剂盒中阳性片作为阳性对照。 1.4 结果判断 免疫组织化学反应结果的判断参照文献〔1〕进行：染色强度：0 分为无色；１分为淡黄色；２分为棕黄色；３分为棕褐色；阳性细胞百分比： 0分为阴性；1分为＜10%；2分为11%～50%；3分为51%～75%；4分为＞75%。将染色强度与阳性细胞百分比乘积作为判断结果：0分为阴性（-）；1～4分为弱阳性（+）；5～8分为中度阳性（）；9～12分为强阳性（）。 1.5 统计学处理 采用SPSS13.0软件包进行χ2检验。 　 2 结 果 2.1 VEGFC在PTC和FTC中的表达结果 见表1和图1。表1 VEGFC、TNFα在PTC及FTC的表达免疫组化SP结果显示，VEGFC蛋白阳性表现为棕黄色颗粒，主要存在于细胞质，VEGFC在正常甲状腺组织中无表达，在PTC和FTC中均有表达。VEGFC在PTC原发灶中的表达明显高于FTC（P＜0.05）。VEGFC在PTC及FTC有颈淋巴转移中的表达明显高于无淋巴转移(P＜0.05)。 2.2 TNFα在PTC和FTC的表达结果 免疫组化SP结果显示，TNFα蛋白阳性表现为棕黄色颗粒，主要存在于细胞膜及细胞质，TNFα在正常甲状腺组织中无表达，在PTC和FTC中有表达。TNFα在PTC原发灶中的表达明显高于FTC（P＜0.05）。TNFα在PTC及FTC伴颈淋巴转移中的表达显著高于无淋巴转移（P＜0.05）（图1和表1）。 3 讨 论 VECFC受体是指VEGFC通过内皮细胞表面的特异性受体VEGFR2（KDR/flk1）和VEGFR3（flt4）发挥作用。VEGFC在甲状腺PTC阳性表达率为88.9%〔2〕，在有淋巴结转移病例中VEGFC表达较高，与其易发生淋巴结转移的特征相符合，特别是TPC，有研究表明淋巴管生成可能在恶性肿瘤淋巴道转移发生、发展过程中起重要作用〔3，4〕。Jussila等的研究结果也表明，VEGFC是潜在的淋巴管生成因子，可以选择性地诱导淋巴管的生成〔5〕。所以说VEGFC促进PTC转移是通过促进淋巴管的生成来实现的。 本实验结果显示VEGFC在PTC中高表达，淋巴管生成较多，为癌细胞的淋巴转移提供可能。PTC及FTC在有淋巴结转移组VEGFC的表达阳性率高于未发生淋巴结转移者，说明VEGFC可促进PTC及FTC的淋巴结转移。 对淋巴管生成机制的研究发现，促使淋巴管生成的因子是VEGFC