高尔基体的光镜观察(0版本).pptVIP

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高尔基体的光镜观察(0版本)

五,注意事项 配制染液时要求使用纯度较高的试剂; 容器必须保证洁净(尤其是浸银所用的玻璃器皿一定冲洗干净,温箱烘干后才能使用); 各试剂浓度必须准确; 切片的厚度越薄效果越好; 固定、浸泡以及还原的时间不能减少; 如用石蜡切片法制备标本,可以长期保存; 实验结果效果图(例图) 本小组展示结束, 谢谢大家捧场!!! 高尔基体的光镜观察 最后一组 梁惠琳 程立 胡洋洋 史千林 蔡杰 徐锋 一,认识高尔基体 高尔基体最早发现于1855年。 1889年,意大利医生Golgi用硝酸银染色法,在猫头鹰和猫小脑的蒲金野氏细胞(一种神经细胞)中,一种嗜银的网状结构,由于存在于细胞内质,高尔基便将其命名为内网器。 20世纪50年代后,电镜的使用,才肯定了高尔基体的真实存在及其结构。 后人为纪念他,改称为:高尔基体(Golgi body)。 形态结构和组成复杂,学者们现一般称:高尔基复合体。 Camillo Golgi 1843-1926 Italian physician/scientist Shared Nobel Prize (1906) with Santiago Ramón y Cajal (Spanish)for their work on the structure of the nervous system. (reticularist vs.neuronalist) 一,认识高尔基体(形态与组成) 是由数个扁平囊泡堆在一起形成的高度有极性的细胞器。常分布于内质网与细胞膜之间,呈弓形或半球形,凸出的一面对着内质网称为形成面(forming face)或顺面(cis face)。凹进的一面对着质膜称为成熟面(mature face)或反面(trans face)。顺面和反面都有一些或大或小的运输小泡,在具有极性的细胞中,高尔基体常大量分布于分泌端的细胞质中。 一,认识高尔基体(形态与组成) 扁平囊直径的1um,由单层膜构成,膜厚6~7nm,中间形成囊腔,周缘多呈泡状,4~8个扁平囊在一起,某些藻类可达一二十个,构成高尔基体的主体,称为高尔基堆(Golgi stack)。 一,认识高尔基体(形态与组成) 高尔基体膜含有大约60%的蛋白和40%的脂类,具有一些和ER共同的蛋白成分。膜脂中磷脂酰胆碱的含量介于ER和质膜之间,中性脂类主要包括胆固醇,胆固醇酯和甘油三酯。高尔基体中的酶主要有糖基转移酶、磺基-糖基转移酶、氧化还原酶、磷酸酶、蛋白激酶、甘露糖苷酶、转移酶和磷脂酶等不同的类型。 冰冻蚀刻法制备的一张高尔基体电镜照片 一,认识高尔基体(功能区隔) 高尔基体顺面的网络结构(cis Golgi network,CGN),是高尔基体的入口区域,接受由内质网合成的物质并分类后转入中间膜囊。 高尔基体中间膜囊(medial Gdgi),多数糖基修饰,糖脂的形成以及与高尔基体有关的糖合成均发生此处。 高尔基体反面的网络结构(trans Golgi network,TGN),由反面一侧的囊泡和网管组成,是高尔基体的出口区域,功能是参与蛋白质的分类与包装,最后输出。 一,认识高尔基体(功能区隔) 高尔基体各部分膜囊具有不同的细胞化学反应:①嗜锇反应,经锇酸浸染后,高尔基体的cis面膜囊被特异地染色;②焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)的细胞化学反应,可特异地显示高尔基体的trans面的1~2层膜囊;③烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)的细胞化学反应,是高尔基体中间几层扁平囊的标志反应;④胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)的细胞化学反应,常常可显示靠近trans面上的一些膜囊状和管状结构,CMP酶也是溶酶体的标志酶,溶酶体就是在此处分泌产生的。 高尔基体的发达程度与细胞分化程度呈正相关。分化好的细胞中,高尔基体较发达;在未分化的细胞中,高尔基体往往较同类成熟型细胞少的多。 一,认识高尔基体(分布特点)基复合体的分布特点 凡是具有分泌作用的细胞,高尔基体均很发达,可见多个高尔基体围成环状或半环状。如杯形细胞、胰腺细胞、唾液腺细胞和小肠上皮细胞等可见到;而肌细胞及淋巴细胞中,高尔基体则罕见。 一,认识高尔基体(主要功能) 高尔基体的主要功能将内质网合成的蛋白质进行加工、分类、与包装,然后分门别类地送到细胞特定的部位或分泌到细胞外。 在动物细胞中的高尔基体与细胞内一些物质的积聚、加工和分泌颗粒的形成有关,在植物细胞中的高尔基体与细胞壁及分泌泡的形成有关。 一,认识高尔基体(主要功能) 1、蛋白质的糖基化 2、参与细胞分泌活动 3、进行膜的转化功能 4、将蛋白水解为活性物质。如将蛋白质N端或C端切除,成为有活性的物质(胰岛素C端)或将含有多个相同氨基序列的前体水解为有活性的多肽,如神经肽。 5、参与形成溶酶体。 6、参与植物细胞壁的形成。 7、合成

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